葡萄糖含量测试盒
产品介绍:
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
测定原理:
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水
产品名称 | 葡萄糖含量测试盒 |
规格 | 100管/96样、50管/48样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 糖代谢系列 |
货号 | YSH3380 |
检测原理:
反应原理:葡萄糖氧化酶 (GOD) 特异性催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸与过氧化氢;过氧化物酶 (POD) 催化过氧化氢与色原底物生成有色物质。
检测依据:生成的醌亚胺类有色物质在 505 nm 有特征吸收峰;吸光度与葡萄糖浓度线性相关。
显色 / 信号机制:过氧化氢氧化 4‑氨基安替比林与酚,缩合生成红色醌类发色基团。
计算原理:葡萄糖标准管对照,采用单点校准法或标准曲线,直接计算样本葡萄糖浓度。
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操作步骤:
操作仪器预热:可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到620nm和510nm,蒸馏水调零标准曲线绘制:
直链淀粉标准曲线:将直链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度,各取0.1mL,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值,绘制标准曲线
支链淀粉标准曲线:将支链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度,各取0.1mL,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值,绘制标准曲线样本测定:取0.1mL待测样本,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值
ELISA法操作试剂准备:将试剂盒从冷藏环境中取出,室温平衡15-30分钟;将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加温育:除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)显色:每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min终止:每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算:绘制标准曲线,按曲线方程计算样本浓度
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