外切β1，4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(C1)测试盒
产品介绍：
C1存在于细菌、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
测定原理：
采用3,5－二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品名称 | 外切β1，4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(C1)测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 糖代谢系列 |
货号 | YSH3470 |
检测原理：
反应原理：外切葡聚糖酶从纤维素多糖链非还原端依次切下纤维二糖；纤维二糖再经 β‑葡萄糖苷酶水解生成葡萄糖，DNS 测还原糖。
检测依据：540nm 显色吸光度与外切酶水解纤维素释放还原糖量成正比；外切酶主要降解结晶纤维素区域。
显色 / 信号机制：外切作用产生可溶性纤维二糖，进一步分解成葡萄糖；还原糖还原 DNS 生成棕红色有色物质。
计算原理：葡萄糖标准曲线定量产物；酶活力：每分钟催化底物生成 1μmol 葡萄糖为 1 U。
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操作步骤：
操作仪器预热：可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到620nm和510nm，蒸馏水调零标准曲线绘制：
直链淀粉标准曲线：将直链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度，各取0.1mL，加入0.9mL碘试剂，摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值，绘制标准曲线
支链淀粉标准曲线：将支链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度，各取0.1mL，加入0.9mL碘试剂，摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值，绘制标准曲线样本测定：取0.1mL待测样本，加入0.9mL碘试剂，摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值
ELISA法操作试剂准备：将试剂盒从冷藏环境中取出，室温平衡15-30分钟；将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样：
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加温育：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min终止：每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算：绘制标准曲线，按曲线方程计算样本浓度
关键字： 外切β1，4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶;C1;测试盒;
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