产品简介
Taq DNA聚合酶来源于嗜热水生菌,热稳定 DNA 聚合酶,具备 5'→3' 聚合酶活性以及 5'‑3' 外切酶活性,无 3'‑5' 校对外切酶活性,主要用于普通 PCR 扩增,末端会加 A 尾,可用于 TA 克隆。仅限体外科研 PCR 实验,不能用于临床诊断。
技术参数
1. 状态:甘油保存的酶液
2. 储存缓冲:含 Tris‑HCl、KCl、DTT、甘油
3. 活性:热稳定,最适反应温度 72℃
4. 无 DNase,无 RNase
5. 配套:通常附带 10×PCR 反应缓冲液(含 Mg²⁺或不含 Mg²⁺)
储存条件
- 酶原液:‑20℃保存,避免反复冻融;有效期 12 个月。全程冰上操作取用。
- 10× 缓冲液:‑20℃或者 4℃均可保存。
使用方法
1. PCR 体系冰上配制,按体系加入模板、引物、dNTP、10×buffer、Mg²⁺、Taq 酶,补水至总体积。
2. 常规 PCR 程序:94℃预变性;变性‑退火‑延伸循环;72℃终延伸。延伸步骤 72℃,约 1kb/min。
3. 酶用量不宜过高,过高易产生非特异性扩增。
使用注意事项
1. 酶对室温温度敏感,取用全程置于冰盒,用完立刻放回‑20℃。
2. 不具备 3'‑5' 校对活性,扩增片段会引入碱基错配;高保真扩增不要选用本酶。
3. Mg²⁺浓度显著影响扩增特异性,需要根据模板引物优化。
4. 防止核酸污染,设置阴性对照。
5. 仅用于体外 PCR 科研,不可用于临床检测。
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上海研生实业有限公司
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