T7 RNA聚合酶

产品简介

T7 RNA聚合酶来源于 T7 噬菌体，重组表达纯化得到的 DNA 依赖的 RNA 聚合酶。特异性识别 T7 启动子序列，以 DNA 为模板催化 RNA 体外转录合成，应用于体外转录、sgRNA 合成、RNA 探针制备、mRNA 体外合成等分子生物学体外实验。仅限科研体外使用，不可用于临床诊断及人体相关用途。

技术参数

1. 来源：重组大肠杆菌表达

2. 性状：透明液体，含有储存缓冲液

3. 活性：≥500 U/μL

4. 纯度：SDS‑PAGE 纯度＞95%

5. 无 DNase、无 RNase 污染

6. 储存缓冲成分：Tris‑HCl、NaCl、DTT、EDTA、甘油

7. 反应依赖：需要 T7 启动子 DNA 模板，ATP、UTP、GTP、CTP 四种 NTP，Mg²⁺

储存条件

- 原液：‑20℃保存，禁止反复冻融，有效期 12 个月；避免置于冰箱门位置温度波动。

- 工作稀释液：现配现用，冰上操作，不建议储存。

反应体系参考

1. 反应缓冲液配套提供；反应温度 37℃。

2. 典型 20 μL 转录体系：DNA 模板、NTP Mix、T7 反应缓冲液、T7 RNA 聚合酶，补无酶水至体系体积。

3. 反应结束可采用 DNase I 处理去除 DNA 模板，纯化回收 RNA 产物。

使用注意事项

1. 全程无 RNase 污染操作，使用无酶枪头、离心管。

2. 酶液不要涡旋，轻柔弹管底混匀；酶置于冰上取用，用完立刻放回‑20℃。

3. Mg²⁺浓度对转录效率影响大，按照说明书体系配比。

4. 避免高温放置，室温长时间放置会造成酶活性快速丧失。

5. 仅供体外分子实验，不能用于体内。

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