产品简介
BCA蛋白浓度测定试剂盒基于 BCA 比色法测定蛋白样本浓度。在碱性环境下蛋白质将 Cu²⁺还原为 Cu⁺,Cu⁺与 BCA 试剂结合形成紫色复合物,562nm 处吸光度与蛋白浓度成正比。可用于裂解液、提取蛋白、纯化蛋白样本的蛋白定量。仅限科研体外检测,不可临床诊断。
试剂盒组分
1. BCA 试剂 A
2. BCA 试剂 B
3. 蛋白标准品(BSA,冻干 / 溶液)
技术参数
- 检测波长:562 nm
- 检测线性范围:20‑2000 μg/mL
- 检测样本:蛋白裂解液、纯化蛋白;高浓度还原剂、高浓度螯合剂会干扰检测
- 检测时间:30‑60 min
储存条件
- 试剂盒组分:2‑8℃避光保存,有效期 12 个月
- BCA 工作液:试剂 A 与试剂 B 按 50:1 现配现用,现配现用不可储存
- BSA 标准品:分装‑20℃保存,避免反复冻融
操作步骤简要
1. 配制 BCA 工作液:A 液:B 液 = 50:1,充分混匀。
2. 蛋白标准品梯度稀释,制作标准曲线。
3. 将标准品与待测蛋白样本加入 96 孔板;每孔加入 BCA 工作液。
4. 混匀,37℃孵育 30 min;冷却至室温。
5. 酶标仪 562nm 读取 OD 值;依据标准曲线计算样本蛋白浓度。
使用注意事项
1. 强还原剂(DTT、β‑巯基乙醇)、高浓度 EDTA 会干扰显色,样本尽量去除干扰物质。
2. BCA 工作液现配现用,不可储存。
3. 孵育温度、时间要统一,否则影响定量准确度。
4. 脂类、高去污剂浓度会造成背景偏高。
5. 仅用于科研蛋白定量,不作为临床诊断试剂。
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上海研生实业有限公司
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