人B7-1(CD80,又称B7、B7.1、BB1、CD28LG、CD28LG1、LAB7)是免疫球蛋白超家族成员,作为共刺激分子表达于活化的B细胞、T细胞、巨噬细胞和树突状细胞表面,通过与T细胞表面的CD28(提供激活信号)和CTLA-4(提供抑制信号)结合,构成调控T/B细胞应答的主要共刺激通路之一;CD80与CD86协同启动T细胞 priming,并可通过激活巨噬细胞中NF-κB信号通路参与天然免疫,是自身免疫性疾病与多种肿瘤治疗的 promising 靶点。ACROBiosystems提供三种HEK293(HEK293)细胞表达的重组人B7-1蛋白:His标签(B71-H5228)、小鼠IgG2a Fc低内毒素标签(B71-H52A4)及人IgG1 Fc标签(B71-H5259),表达区间均为Val 35 – Asn 242(Accession # P33681-1 / NP_005182.1)。三款蛋白均经MALS或SEC-MALS纯度验证(≥95%或更高),并经SPR、BLI、ELISA、FACS多方法验证与CTLA-4、CD28、PD-L1的结合活性,可广泛用于肿瘤免疫检查点研究、抗体药物筛选及细胞结合实验。
货号
产品描述
物种
标签/标记
规格
B71-H5228
人B7-1/CD80蛋白,His标签(MALS验证)
人
C端His标签
100 μg;1 mg(500 μg×2)
B71-H52A4
人B7-1/CD80蛋白,小鼠IgG2a Fc标签,低内毒素(MALS验证)
C端小鼠IgG2a Fc标签
100 μg;1 mg
B71-H5259
人B7-1/CD80蛋白,Fc标签(MALS验证)
C端人IgG1 Fc标签
*更多属性及规格请咨询销售。
优势
说明
高纯度,MALS/SEC-MALS验证
B71-H5228经SEC-MALS验证纯度>95%(分子量约38-55 kDa);B71-H5259经SEC-MALS验证纯度>95%(约125-135 kDa);B71-H52A4经SDS-PAGE验证纯度>95%
多标签形式,灵活适配
提供C端His(B71-H5228)、小鼠IgG2a Fc(B71-H52A4)、人IgG1 Fc(B71-H5259)三种标签,覆盖ELISA、SPR、BLI、FACS等多种实验架构
SPR验证结合活性(CD28)
SPR验证:B71-H5228与CD28-Fc(CD8-H525a)在CM5芯片上亲和力5.29 μM(Biacore T200);B71-H52A4亲和力2.72 μM;B71-H5259亲和力2.01 μM(均为Routinely tested)
BLI验证高亲和力(CTLA-4)
BLI验证:B71-H5228与CTLA-4-Fc(CT4-H5255)亲和力0.52 μM;B71-H5259与CTLA-4-Fc活性二聚体(CT4-H52H9)亲和力0.498 nM(ForteBio Octet Red96e)
低内毒素,细胞级应用友好
B71-H52A4为低内毒素版本,内毒素<0.1 EU/μg(LAL法);B71-H5228与B71-H5259内毒素<1.0 EU/μg,适用于功能与细胞实验
应用领域
肿瘤免疫检查点研究
B7-1/CD80与CTLA-4、CD28构成共刺激通路,是免疫检查点抗体(如Ipilimumab类)作用机制与阻断研究的关键靶蛋白(B71-H5259可FACS结合过表达CTLA4的293T细胞,1 μg/mL)
抗体药物筛选与阻断实验
可用于CTLA-4/PD-L1抗体、双抗及抑制剂筛选;ELISA验证B71-H5228与CTLA-4-Fc(CT4-H5255)结合线性区间0.078-1.25 μg/mL(QC tested)
PD-L1/B7-1相互作用研究
B71-H5259与生物素化人PD-L1-Fc/Avitag/His(PD1-H82F3)结合线性区间0.02-1.25 μg/mL;与生物素化CTLA-4-Fc/Avitag(CT4-H82F3)结合0.6-10 ng/mL
细胞结合与流式(FACS)
B71-H5259经FACS验证可结合过表达人CTLA4的293T细胞,适用于细胞水平受体-配体互作分析
自身免疫与肿瘤机制研究
CD80作为自身免疫性疾病与多种肿瘤的治疗靶点,蛋白可用于相关信号与功能机制研究
提供三种HEK293细胞表达的重组人B7-1蛋白:C端His标签(B71-H5228,分子量计算25.8 kDa,SDS-PAGE迁移40-60 kDa)、小鼠IgG2a Fc低内毒素标签(B71-H52A4,计算50.9 kDa,迁移65-100 kDa)以及人IgG1 Fc标签(B71-H5259,计算50.0 kDa,迁移65-90 kDa),表达区间均为Val 35 – Asn 242。
多重方法验证:SPR验证B71-H5228、B71-H52A4、B71-H5259与人CD28-Fc的亲和力分别为5.29 μM、2.72 μM、2.01 μM(Biacore T200);BLI验证B71-H5228与CTLA-4-Fc亲和力0.52 μM、B71-H5259与CTLA-4-Fc活性二聚体亲和力0.498 nM;ELISA与FACS(B71-H5259结合过表达CTLA4的293T细胞)亦验证其活性。
产品以冻干态运输(常温运输稳定);长期保存应置于-20°C或更低,避免反复冻融。冻干态在-20°C至-70°C可稳定12个月,复溶后在-70°C无菌条件下可稳定3个月。复溶请遵循CoA中的说明以获得最佳性能。
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