植物组织直接PCR试剂盒

产品描述
 

植物组织直接PCR试剂盒是一款可直接对不同类型植物叶片进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒采用独特的裂解缓冲液体系，可以快速的裂解多种植物样品并释放出基因组DNA，不需要除去蛋白、RNA或次生代谢产物等，即可将释放出的基因组DNA作为模板直接用于PCR反应。此外，样品使用量少，低至1 mg植物叶片即可进行实验。

本试剂盒中提供的2× Plant Master Mix具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合液，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，大大简化操作过程，降低污染几率。
该试剂盒可用于转基因植株鉴定、植物基因分型等。

产品组分
 

a）6× DNA Loading buffer：不含SDS。

b）2× Plant Master Mix：包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl₂、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂等。

运输方法
 

冰袋运输。

保存方法
 

1. 试剂10183-A【Buffer P1】，在常温干燥条件下，可保存12个月，如需保存更长时间可置于4℃。低温保存，易出现沉淀，可平衡至室温或37℃水浴10 min，待沉淀溶解后，混匀使用。

2. 试剂10183-B【Buffer P2】，中和裂解产物，使其不影响后续 PCR 反应。保存条件与Buffer P1一样。
3. 试剂10183-C【6× DNA Loading Buffer】，可置于4℃或-20℃长期保存。

4. 试剂10183-D【2× Plant Master Mix】，-20℃保存，避免反复冻融。如果环境温度过高，2× Plant Master Mix 可能会变浑浊，可置于冰上放置1-2 min，待溶液澄清，上下颠倒混匀3-5次后再使用。

  

 

操作方法
 

本试剂盒根据不同实验需求提供了两种操作方法。直接法仅需要将一小片植物组织加入PCR反应体系即可；裂解法则是将少量含有植物组织的裂解产物加入PCR反应体系。其中，裂解法适合目的片段较长，扩增难度较大，以及需要对同一样本进行多次PCR扩增的实验。

裂解法

1. 取3-5 mg叶片（直径5-7 mm）组织，置于200 μL或1.5 mL离心管中。

注：切勿加入过量叶片组织，以便酶解反应更顺利进行。

2. 在离心管中加入50 μL Buffer P1，确保裂解液能够完全浸没叶片组织。

3. 盖好离心管盖，95℃处理10 min。

注：加热后，若管壁上液体较多，可进行短暂瞬时离心。

4. 加入50 μL Buffer P2，用微量移液器吹打或者涡旋混匀。

5. 所得裂解液可4℃保存（5天）或-20℃长期保存或直接用于PCR扩增。

直接法

1. 在200 μL离心管中加入相应的2× Plant Master Mix，再添加对应的引物，并用ddH₂O使其稀释1×（PCR体系配置见下表）

2. 剪取1-2 mg叶片碎块（直径2-3 mm）加入配置好的1×PCR反应体系。

注：确保叶片碎块完全被PCR反应液浸没，切勿加入过量组织叶片。

3. 根据优化好的PCR条件（退火温度等）进行PCR反应。

4. 琼脂糖凝胶电泳检测结果。

注：建议使用试剂盒提供的6× DNA Loading Buffer，切勿使用含有SDS的Loading Buffer进行电泳。

上海翊圣生物科技有限公司（Yeasen Biotech Co., Ltd.）成立于2009年，是专注于酶制剂和抗原抗体开发的高新技术型企业，致力于为生命科学研究领域内的科研客户及精准医疗相关行业的工业客户提供高质量的产品和优质的服务。 公司现阶段建设有分子、蛋白、细胞和免疫四大技术平台，涵盖全面丰富的产品线，包括PCR、qPCR、高保真DNA聚合酶、逆转录相关制剂、克隆试剂盒、高通量测序MaxUP系列DNA和RNA建库试剂盒、细胞培养、支原体检测/预防/去除试剂，以及体外诊断相关的酶原料、试剂和磁珠等3000多种试剂和试剂盒，服务于全国各级高校、研究所、医院、第三方检测机构、生物医药公司等2.5万家客户，助力发表高质量SCI论文1000余篇。 未来，我们仍