"hBMSCs细胞系|人骨髓间充质干细胞 HS-C0366848 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 hBMSCs细胞系|人骨髓间充质干细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。 A2780细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代 EAC-E2G8细胞系;细胞生长特性:半贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 CAL27细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 DU 145细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3传代,2-3天换液一次 FRO细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 BE(2)M17细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 hBMSCs细胞系|人骨髓间充质干细胞 细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分 细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒:包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 细胞形态特性:详见细胞说明书 NCI-H2029细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3-1:5传代; MH-22A细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 U266B1细胞系;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代 NCI-H157细胞系;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代 HOSEpiC细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 CAOV-4细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 hBMSCs细胞系|人骨髓间充质干细胞 SRA01/04细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NOZ细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 CAL-33细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 RPTC细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 Y-1 cell line细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代 Tca-83细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 SU-DHL-2细胞系;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NCI-H727[H727]细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NCI-H838[H838]细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 HT-29细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代 KE-39细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 HOPC细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 U-2OS细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周2-3次。 PC14细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 LK2细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 HuNS1细胞系;细胞生长特性:悬浮生长 ;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:2-3天换液1次。 NCI-H82细胞系;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2—1:5传代,每周换液2-3次 Hs 675.T细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代,每周2-3次。 Hs 604.T细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2传代;每周换液2-3次。 U-2 OS细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周2-3次。 OV2008细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 ALVA细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 Mono-Mac-6细胞系;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2传代 RT4细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多角 ;细胞传代方法:1:2-1:4传代,每周2-3次。 NCI-H2452[H2452]细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 EOMA细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代 KNS-62细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:每周换液2次。 KMS18细胞系;细胞生长特性:半贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 HCT116细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 CEF细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NCI-H1882[H1882]细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 E.G7-OVA细胞系;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:细胞密度保持在1×105—1×106 cells/ml,每周换液2—3次 HD11细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 CRFK细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 SW-13细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代 HSC-5细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 COLO 320DM细胞系;细胞生长特性:悬浮+贴壁;细胞形态特性:淋巴细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 HSC-T6细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代 KMB17细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 MUVEC细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 CTX TNA2细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 FHC细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 HMEC-1细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代 LP-1细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 MONO-MAC-1细胞系;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 EAG3细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NCI-H1105细胞系;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:每周换液2-3次 McCoy细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 RH30[RC13,RMS13,SJRH30]细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 SW 1353细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2传代。3天内可长满。 TC-1细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NRK49F细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NCI-H295细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 Hs 766T细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2—1:8传代,每周换液2—3次 PG细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 HMEL细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 hBMSCs细胞系|人骨髓间充质干细胞 BC-009细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NCI-H211[H211]细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 NE-4C细胞系;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 Hcaf细胞系;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 RPMI-7951细胞系;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2天换液1次。 "
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