DAPI

配制储存液：在双蒸水中溶解至终浓度1–2 mg/ml。注意: 不要使用任何缓冲液为了长时间保存，可将储存液分装并保存于-20℃。短期保存可避光置于2-6 ℃，如果处理适当，DAPI溶液可以稳定保存至少6个月。配制工作液：将储备液用甲醇稀释至合适浓度单层培养的染色1. 使培养基达到 50–70% confluence.2. 去除细胞里的培养基3. 用 DAPI-甲醇（工作液清洗一次）4. 将细胞用DAPI-甲醇溶液在37℃孵育15 min5. 倒掉染色液6. 用甲醇清洗一次7. 将细胞放于载玻片上，并盖盖玻片，用甘油或者PBS作为封固剂，避免接触水。用荧光显微镜在340/380 nm感光滤光片以及LP 430 nm隔紫外滤光片观察荧光。通常观察支原体需要放大500 × (40 × 12.5)，但使用油镜观察以获得更好的效果。悬浮培养的染色步骤：1.将细胞离心，倒掉上清。2.在DAPI-甲醇溶液中清洗一次。3. 将细胞用DAPI-甲醇溶液在37℃孵育15 min4. 离心5. 去除染色液6. 加入PBS悬浮细胞7. 在载玻片上滴加一滴，用盖玻片盖住，并在荧光显微镜下观察。