B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系

"B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：该细胞源于C５７BL/６J小鼠黑色素瘤，可以产生黑色素，同基因小鼠体内移植可成瘤
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
H-3255细胞系相关产品：HT 1080细胞、RL95细胞、B16-F10--RED细胞
ME-180细胞系相关产品：B16BL-6细胞、B16 F1细胞、SJ-Rh 30细胞
OV1-P细胞系相关产品：H740细胞、SK-ChA-1细胞、UPCI:SCC154细胞
细胞生长：贴壁
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法：１：３传代，２-３天换液一次
COLO-394细胞系相关产品：H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞
DC 2.4细胞系相关产品：526细胞、HFLS-OA细胞、NBL-S细胞
LX-2细胞系相关产品：MDA-MB-435S细胞、OVCA433_Bast细胞、GM04678细胞
RCC_7860细胞系相关产品：U-2 OS细胞、IOSE80UBC细胞、OLN93细胞
NCI-747细胞系相关产品：Ramos-2G6-4C10细胞、CHG5细胞、FRO81-2细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：梭形
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
NKT细胞系相关产品：MASMC细胞、Tca8113细胞、SKMEL5细胞
LTEP a2细胞系相关产品：P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞
LN 382细胞系相关产品：SK-N-FI细胞、T98G细胞、HuNS1细胞
Clone M-3细胞系相关产品：MDA-MB435细胞、MOPC细胞、SNU-368细胞
3LL细胞系相关产品：HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞
Dx5细胞系相关产品：NCI-UMC-11细胞、Saos2细胞、GT39细胞
OVCAR.4细胞系相关产品：CCRF/CEM细胞、BeWo细胞、MDCC MSB1细胞
SF 767细胞系相关产品：TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞
U373MG细胞系相关产品：TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
MCF-10 Attached细胞系相关产品：NCIH929细胞、E6-1细胞、RL952细胞
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
WEHI164细胞系相关产品：RMS 13细胞、BL2141细胞、HCC0202细胞
BT 325细胞系相关产品：BCaP-37细胞、KNS-62细胞、DU-4475细胞
NCI-H1930细胞系相关产品：TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞
KB细胞系相关产品：T-ALL1细胞、H-2171细胞、SUM-159PT细胞
J774细胞系相关产品：LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞
MFE-280细胞系相关产品：HSAS3细胞、JB6Cl30细胞、L- cell细胞
CTX TNA2细胞系相关产品：JB-6 Cl 30细胞、USMC细胞、C-32细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品：SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞系相关产品：H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞
EoL-1-cell细胞系相关产品：BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞
H-498细胞系相关产品：NHRF细胞、SNU368细胞、COLO 320 DM细胞
SHI-1细胞系相关产品：T24(ECV304)细胞、C32r细胞、A 172细胞
3AO细胞系相关产品：TH1细胞、H711细胞、RN细胞
RPMI8226细胞系相关产品：TERT-RPE1细胞、PLA801-95C细胞、LIPF178C细胞
EAhy926细胞系相关产品：Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
J774 A.1细胞系相关产品：SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞
Hi5细胞系相关产品：JC细胞、SKCO1细胞、CEMx721.174.T2细胞
SCL-I细胞系相关产品：WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞系相关产品：18G3.cl 1细胞、NCIH226细胞、Pa16C细胞
T-HEECs细胞系相关产品：QBI-HEK 293A细胞、MV4;11细胞、MDA134细胞
THC-8307细胞系相关产品：LS 123细胞、SW-403细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞
NCI522细胞系相关产品：MDA-kb2细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、OCI-LY-19细胞
MZ-CRC-1细胞系相关产品：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞
3AO细胞系相关产品：TH1细胞、H711细胞、RN细胞
T47D细胞系相关产品：AR-42J细胞、Hs895T细胞、Hs888T细胞
B16BL6细胞系相关产品：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
Rca-B细胞系相关产品：GT39细胞、MDA-MB 231细胞、NCI-H1792细胞
CCC-HIE-2细胞系相关产品：HEK293EBNA细胞、293 H细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞
SW-1222细胞系相关产品：SEG1细胞、GTL 16细胞、RCK-8细胞
SK-MES-1细胞系相关产品：NEC细胞、SU-86-86细胞、Simpson细胞
U87 MG细胞系相关产品：F56 [Human neoplasm]细胞、Chinese Hamster Lung细胞、NCI-H929细胞
Hs 895.T细胞系相关产品：DMS 79细胞、SRA01/04细胞、HOP 92细胞
OC-3-VGH细胞系相关产品：SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞
TSU-Pr1细胞系相关产品：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品：NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
End1/E6E7细胞系相关产品：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
SKMEL5细胞系相关产品：C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞
SW954细胞系相关产品：KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞
Tca-83细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-33细胞、NCI-H1648细胞、NCI-H1355细胞
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞
U-251细胞系相关产品：Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
PANC0813细胞系相关产品：293c18细胞、P3/ag细胞、BRL-3A细胞
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞
J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
TO 175.T细胞系相关产品：RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
OCM1细胞系相关产品：CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞
L929(NCTC)细胞系相关产品：C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
H-596细胞系相关产品：H-661细胞、CAL62细胞、Tb1Lu细胞
BNCL-2细胞系相关产品：CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞
alpha TC1-6细胞系相关产品：Namalva细胞、H-1688细胞、NCIH2228细胞
TPC-1细胞系相关产品：OUMS23细胞、D407 RPE细胞、RTE细胞
B16 epithelioid cells小鼠黑色素瘤细胞系
PCI:SG-231细胞系相关产品：SK-ES1细胞、Hs 27细胞、Hs 706.T细胞
RL-952细胞系相关产品：B16细胞、Strain V细胞、Hep G2细胞
COLO206细胞系相关产品：NALM-6-M1细胞、IEC6细胞、NP-69细胞
LN 382细胞系相关产品：SK-N-FI细胞、H146细胞、NTera2 cl.D1细胞
"