NCI-H146 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系

"NCI-H146 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
MDA-175细胞系相关产品：Tn-5细胞、KY180细胞、M4e细胞
U-CH1细胞系相关产品：CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞
Rat Lung-65细胞系相关产品：M-07e细胞、OCI Ly3细胞、Mv.1.Lu细胞
细胞生长：贴壁
NCI-H146 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２—１：６传代，每周换液２-３次
QSG-7701细胞系相关产品：SW 626细胞、Y3-Ag1.2.3细胞、RPTC细胞
Hs 766.T细胞系相关产品：NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞
HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞
FLC7细胞系相关产品：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
HBE 135-E6/E7细胞系相关产品：FHL-124细胞、SCC 9细胞、HPMC细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H146 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：悬浮生长
细胞形态特性：上皮细胞
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
SMA560细胞系相关产品：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞
4175细胞系相关产品：OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞
118MG细胞系相关产品：SUP-B1细胞、Detroit 562细胞、LM1细胞
NCIH250细胞系相关产品：NCIH322细胞、8305-C细胞、SNU-761细胞
WM-2664细胞系相关产品：Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞
HCC0044细胞系相关产品：C-4 I细胞、Hs 852.T细胞、VERO76细胞
NCIH2347细胞系相关产品：SW-48细胞、MFE296细胞、KOPN8细胞
U-87 MG细胞系相关产品：LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
SCCVII/St细胞系相关产品：Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞
AZ521细胞系相关产品：3T6 Swiss Albino细胞、X63Ag8-653细胞、Uhth-74细胞
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H-1404细胞系相关产品：RPMI.8226细胞、CCC-HSF-1细胞、HTR-8细胞
NCI-H1092细胞系相关产品：RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞
JB6 [Mouse]细胞系相关产品：NRK49F细胞、CL1-5细胞、ST-2细胞
CMT-167细胞系相关产品：SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞
SJSA细胞系相关产品：CAL 12T细胞、MHCC-LM3细胞、Th17细胞
SUM-52-PE细胞系相关产品：MDA MB 175 VII细胞、HN13细胞、HuH1细胞
Pa017C细胞系相关产品：PLA802细胞、CWR22Rv1细胞、Li-7细胞
SW-1271细胞系相关产品：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
CCD966SK细胞系相关产品：KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞
WSU-DLCL(2)细胞系相关产品：MDCK细胞、V 79-4细胞、HCV 29细胞
NCIH2172细胞系相关产品：MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞
HCC-202细胞系相关产品：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
Wien133细胞系相关产品：CHL-CL-11细胞、BALL1细胞、LTEP-a2细胞
RL-95-2细胞系相关产品：SK-ES-1细胞、Y3-Ag123细胞、SUDHL2细胞
B95-8细胞系相关产品：TE 32.T细胞、CoC1细胞、118MG细胞
NCI-H87细胞系相关产品：7404细胞、RH-35细胞、COLO824细胞
SCC VII细胞系相关产品：AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞
Hs840T细胞系相关产品：BTI-Tn5B14细胞、NCI H548细胞、HT-55细胞
RAEC细胞系相关产品：HCC2279细胞、NCIH2122细胞、HM06.A1细胞
SkChA-1细胞系相关产品：CMT93细胞、Human ErythroLeukemia细胞、H-211细胞
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NCIH2141细胞系相关产品：Large Cell Lung Cancer-103H细胞、BJAB-1细胞、MESSA-DX5细胞
HPMEC细胞系相关产品：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
PTK 2细胞系相关产品：COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞
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H1993细胞系相关产品：Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞
A2780细胞系相关产品：RMG1细胞、Sf21细胞、CCD 841 CoTr细胞
SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞
COV-434细胞系相关产品：HT-1376细胞、PNT-1A细胞、B16BL6细胞
MUTZ3细胞系相关产品：Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞
H-1155细胞系相关产品：143BTK-细胞、LN 229细胞、hADSCs细胞
293/EBNA细胞系相关产品：LS-180细胞、Line 870 Emory University-4细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞
HMEL细胞系相关产品：Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞
A204细胞系相关产品：HuT 102细胞、KY-270细胞、TK10细胞
mIMCD3细胞系相关产品：BC-023细胞、CEM C7细胞、CNE-1细胞
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D283MED细胞系相关产品：Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
CFSC-8B细胞系相关产品：L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
NCI-H322T细胞系相关产品：Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞
LLC1细胞系相关产品：JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞
NCIH378细胞系相关产品：COLO320-DM细胞、COS-7细胞、EC9706细胞
MLM细胞系相关产品：NCI-H1581细胞、NPA-87细胞、GM03320D细胞
P30-OHK细胞系相关产品：MDA468细胞、KU812-F细胞、H441细胞
CD18/HPAF细胞系相关产品：NB-9细胞、RL95-2细胞、Chinese Hamster Lung细胞
GM05887细胞系相关产品：RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞
CL1-5细胞系相关产品：HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
MCA 205细胞系相关产品：SW 1417细胞、Vero-E6细胞、SCL1细胞
NCI-H146 epithelioid cells人小细胞肺癌细胞系
U-251 MG细胞系相关产品：AML-EOL-1细胞、AMO1细胞、PC615.3细胞
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U138MG细胞系相关产品：HT3细胞、BV173细胞、HEC251细胞
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