hCMEC/D3 epithelioid cells永生化人脑微血管内皮细胞系

"hCMEC/D3 epithelioid cells永生化人脑微血管内皮细胞系
细胞背景资料：脑微血管；内皮细胞
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
NCI-H295R细胞系相关产品：OCI-LY-8细胞、MIA-PaCa-2细胞、NCI-H1954细胞
NCI-H1522细胞系相关产品：H441细胞、GM03671细胞、SK-HEP-1细胞
SF295细胞系相关产品：H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞
细胞生长：贴壁
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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法：１．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。３．剪开纱布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加１０ml培养液，吹打使细胞悬浮。４．低速离心（５００～１０００转/分）５分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。５．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T２５ flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T２５ flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T２５ flask静置于３７°C，５%CO２培养箱中，使细胞回温至３７°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约５-１０ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
JURKAT E-6.1细胞系相关产品：MEL细胞、NCIH647细胞、Balb/c3T3细胞
SK-Mel 2细胞系相关产品：GMK,BSC-1细胞、YAC细胞、Tb 1 Lu细胞
HSKMC细胞系相关产品：C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞
SuDHL 1细胞系相关产品：HSKMC细胞、BE2M17细胞、NCIH3255细胞
K-1735细胞系相关产品：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°C高压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
MLE-12细胞系相关产品：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞
U343细胞系相关产品：HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞
343MG细胞系相关产品：Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
H766T细胞系相关产品：Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞
T-98G细胞系相关产品：COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞
SF 539细胞系相关产品：SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
hs 68细胞系相关产品：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞
MIA-Pa-Ca-2细胞系相关产品：451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞
H1563细胞系相关产品：GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
Sp2/0细胞系相关产品：H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞
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JB-6细胞系相关产品：H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
697细胞系相关产品：NUGC3细胞、CCD 841 CoN细胞、NCI-H841细胞
16-HBE细胞系相关产品：MN60细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、IPLB-Sf21-AE细胞
COLO 16细胞系相关产品：EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
786-0细胞系相关产品：NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞
SV40-HCEC细胞系相关产品：IOSE-Mar细胞、Capan 2细胞、Nthy ori 3.1细胞
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Fetal Human Colon细胞系相关产品：GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞
CL34细胞系相关产品：HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
IEC 6细胞系相关产品：NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
Nthy-ori 3-1细胞系相关产品：Hs 636 T细胞、LYR细胞、L 929细胞
T-HSC细胞系相关产品：SNU-119细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、ROS17/2.8细胞
SW1417细胞系相关产品：B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞
FRTL5细胞系相关产品：HPASMC细胞、HARA-B细胞、FDCP-1细胞
LC-2 ad细胞系相关产品：C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
Giant Cell Tumor细胞系相关产品：L- cell细胞、NCI-H69细胞、E.L.4细胞
H2196细胞系相关产品：LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞
T173细胞系相关产品：Hep-G2/C3A细胞、GOS3细胞、SUNE-1细胞
HNE-1细胞系相关产品：SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
RGC5细胞系相关产品：HeLa.S3细胞、L- cell细胞、SW839细胞
RPMI 8226细胞系相关产品：LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞
MDA 231-LM2-4175细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Ca761细胞、H719细胞
RC92A细胞系相关产品：NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞
FU-OV-1细胞系相关产品：NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞
X63-AG 8.653细胞系相关产品：LAN-5细胞、OVCAR433细胞、H-157细胞
Hs 688(A).T细胞系相关产品：SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
32D clone 3细胞系相关产品：A875细胞、MDA231-LM2细胞、N-9细胞
Simpson细胞系相关产品：RERFLCMS细胞、TE-9细胞、UMRC-2细胞
H-345细胞系相关产品：V79细胞、X63.Ag8.653细胞、MDA-PCa-2b细胞
143B细胞系相关产品：JVM2细胞、Hs-695-T细胞、V 79-4细胞
Chang Cells细胞系相关产品：Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞
RCC10细胞系相关产品：LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞
TCMK-1细胞系相关产品：L-02细胞、LM1细胞、NCIH28细胞
HO-1-N-1细胞系相关产品：PGLH7细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、HUSMC细胞
MALME 3M细胞系相关产品：A204细胞、HaCaT细胞、MDCK II细胞
MeT-5A细胞系相关产品：A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
Hs729细胞系相关产品：Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞
NBL-2细胞系相关产品：NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞
GH 3细胞系相关产品：HLCL9B10细胞、SP-2/0-AG14细胞、SU-DHL2细胞
HCGC细胞系相关产品：BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品：T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞
NCI-H23细胞系相关产品：HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
COLO-1细胞系相关产品：Hs 766T细胞、OACP4 C细胞、Hs-675-T细胞
NCIH2170细胞系相关产品：Karpas-422细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、OCILY7细胞
Hs-611-T细胞系相关产品：HCC-202细胞、H-1618细胞、Sol8细胞
GM-346细胞系相关产品：OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞
BAEC细胞系相关产品：C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞
CCD-966SK细胞系相关产品：P3X63Ag8653细胞、H-1836细胞、PJ34细胞
Hela-mock细胞系相关产品：LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞
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B16/BL6细胞系相关产品：ketr 3细胞、Huh-7.5细胞、RWPE2细胞
3T3J2细胞系相关产品：UMRC2细胞、P3-Jiyoye细胞、PC-12细胞
AMO1细胞系相关产品：RKO-AS-45-1细胞、PANC 327细胞、RPMI no. 8226细胞
343MG细胞系相关产品：Fox/NY细胞、H-1975细胞、YES 2细胞
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