"Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤细胞系 细胞背景资料:Raji细胞由PulvertaftRJV于1963年从一位11岁黑人男孩的左上颌骨的Burkitt淋巴瘤中分离建立的,是个人类造血系统的连续传代细胞,为B细胞起源。该细胞中含有EBV,需要在二级生物安全柜中操作;可作转染宿主。 细胞形态:淋巴母细胞样 贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞! NUGC2细胞系相关产品:SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞 CaEs17细胞系相关产品:X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞 CTV1细胞系相关产品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、NEC细胞、PANC.1细胞 细胞生长:悬浮 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。 细胞传代方法:维持细胞浓度在4×105/ml-3×106/ml;根据细胞浓度每2-3天补液1次。 LTEPsm细胞系相关产品:NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞 BT20细胞系相关产品:OV-90细胞、MDAMB361细胞、PANC-04-03细胞 AgC11x3A细胞系相关产品:Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞 D-324 Med细胞系相关产品:NCI-SNU-182细胞、HCT-116细胞、H2066细胞 JROECL33细胞系相关产品:LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤细胞系 细胞生长特性:悬浮生长 细胞形态特性:淋巴母细胞样 细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。 MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品:REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞 H1417细胞系相关产品:Jiyoye细胞、GM03671C细胞、GM2131细胞 Hs.27细胞系相关产品:H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞 Z-138细胞系相关产品:H838细胞、LNCaP-FGC细胞、D283 Med细胞 LOU-NH91细胞系相关产品:CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞 Meat Animal Research Center-145细胞系相关产品:Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞 C8166-CD4细胞系相关产品:KRCY细胞、CAL 27细胞、SMMC 7721细胞 NIH-3T3细胞系相关产品:TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞 BA/F3细胞系相关产品:DSL-6A-C1细胞、HEP-3B2细胞、MDA-MB468细胞 Panc5.04细胞系相关产品:Hs281T细胞、H2342细胞、TOV21细胞 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤细胞系 H35 Reuber细胞系相关产品:CV-1 in Origin Simian-1细胞、RN细胞、MMAc-SF细胞 GP2d细胞系相关产品:CCD19Lu细胞、GM2131细胞、GM637细胞 VMM5细胞系相关产品:NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞 OV-1063细胞系相关产品:C127细胞、SKMES1细胞、HCT-15细胞 MCF-7/ADR-RES细胞系相关产品:PT67细胞、B16-F0细胞、MDAMB-231细胞 C127细胞系相关产品:M 1细胞、PTK 1细胞、TE6细胞 C127细胞系相关产品:M 1细胞、PTK 1细胞、TE6细胞 COLO320 DM细胞系相关产品:RCC 7860细胞、A431/P细胞、MDA-1386细胞 Rh30细胞系相关产品:HT 115细胞、Ramos.G6.C10细胞、JM-Jurkat细胞 C3A细胞系相关产品:TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞 OV-2008细胞系相关产品:IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞 HEK-EBNA细胞系相关产品:SK-ES细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞 RT-BM-1细胞系相关产品:HUC-1细胞、HCC1806细胞、GM 2132细胞 SK-OV-433细胞系相关产品:KYSE-450细胞、WIL2S细胞、DMS 273细胞 IMR 32细胞系相关产品:RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞 SW 1116细胞系相关产品:WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞 Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品:451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞 BNL.CL2细胞系相关产品:TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞 H1105细胞系相关产品:CHP 126细胞、SW579细胞、D-324MED细胞 EBC-1细胞系相关产品:HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞 HUT-226细胞系相关产品:RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞 8226细胞系相关产品:HCT-15细胞、H-1930细胞、NCI H295R细胞 SKNDZ细胞系相关产品:751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞 G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品:T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞系相关产品:OVCAR-5细胞、A-101D细胞、FCCH1018细胞 NCI-H460细胞系相关产品:SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞 LWnt-3A细胞系相关产品:A549 ATCC细胞、Epstein-Barr-3细胞、DMS 114细胞 NCIH1993细胞系相关产品:3AA细胞、KPL4细胞、HUV-EC-C细胞 QGY-7701细胞系相关产品:CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞 HuT78细胞系相关产品:P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞 BIC细胞系相关产品:NCI-H1563细胞、Adeno 293细胞、Panc-3_27细胞 NMCG1细胞系相关产品:HBVSMC细胞、SaOS-2细胞、HEK-EBNA细胞 OV1-P细胞系相关产品:H740细胞、SK-ChA-1细胞、UPCI:SCC154细胞 CESS细胞系相关产品:EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞 SK-OV-433细胞系相关产品:KYSE-450细胞、WIL2S细胞、DMS 273细胞 DR2R1610细胞系相关产品:253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞 FAO-1细胞系相关产品:LS 174 T细胞、CORL23细胞、NCI-H2330细胞 A431/P细胞系相关产品:NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞 A431/P细胞系相关产品:NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞 NCIH244细胞系相关产品:LIPF155C细胞、MF2059细胞、EJ细胞 OV433细胞系相关产品:HMO6细胞、SH-SY5Y细胞、RSC96细胞 SHIN3细胞系相关产品:HO8910PM细胞、H187细胞、PC 61细胞 JM1细胞系相关产品:MG-HU-3细胞、MOLT 4细胞、S3-HeLa细胞 PANC-04-03细胞系相关产品:MPC-83细胞、ADR-RES细胞、H-II-E-C3细胞 LAN1细胞系相关产品:HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞 OCI-Ly8细胞系相关产品:FRTL5细胞、LCMS细胞、NCI-H69细胞 MA104细胞系相关产品:ONS-76细胞、MOLM16细胞、HSC1细胞 SCC-1395细胞系相关产品:mREC细胞、HCC-1500细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞 HEL-92细胞系相关产品:Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞 RPMI no. 8226细胞系相关产品:BHT-101细胞、G292细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞 Okayama University Medical School-27细胞系相关产品:EHEB细胞、HT 1080.T细胞、2008细胞 Raji Lymphoblastoid cells人Burkitt’s淋巴瘤细胞系 Caco2BBe细胞系相关产品:Tn-5B1-4细胞、OVCAR4细胞、LS174T细胞 NCIH2452细胞系相关产品:B-3细胞、UCLA-RO 81细胞、Panc 10.05细胞 NCI-H1437细胞系相关产品:H2141细胞、C57 Mouse Tumor 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