"RBE Adherent人胆管癌细胞系
细胞背景资料:人肝胆管癌细胞。据说产CEA和CA19-9。
细胞形态:上皮细胞样
细胞培养时分布不均匀,通常操作步骤:做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种,直接用100微升移液器吸取细胞悬液,沿孔壁(稍离开一点孔底即可,不要离底太高)直接接入,移液器不需完全打到,轻轻按下即可,每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用将每个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔依此类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好。培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后),先顺时针摇晃3次,马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RBE Adherent人胆管癌细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
有关实验室细胞培养基知识普及:经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养;MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度;BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞;Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养;RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
PLA802细胞系相关产品:CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞
C4-2细胞系相关产品:BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
H-226细胞系相关产品:RSC96细胞、CAL 62细胞、NCI-H28细胞
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
P3X63细胞系相关产品:GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
P3X63细胞系相关产品:GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
Hs695细胞系相关产品:NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
细胞生长特性:贴壁生长
RBE Adherent人胆管癌细胞系
细胞形态特性:上皮细胞样
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
SK-MEL28细胞系相关产品:Hs 606.T细胞、Hs863T细胞、FRTL-5 Cl 2细胞
SU-DHL1细胞系相关产品:Hs695细胞、HEC1B细胞、Mono-Mac-6细胞
Hs 852.T细胞系相关产品:IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞
NCI-H2009细胞系相关产品:CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞
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RSC96细胞系相关产品:PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞
H4-IIE-C3细胞系相关产品:CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞
CCC-HEL-1细胞系相关产品:SF763细胞、MDA.MB.231细胞、WM-266-mel细胞
UPCISCC090细胞系相关产品:LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、2PK-3细胞、3T3F442A细胞
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RBE Adherent人胆管癌细胞系
RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
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Hs606T细胞系相关产品:FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
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NCI-H1915细胞系相关产品:NCIADRRES细胞、NCI-H2195细胞、SK-N-BE-2c细胞
RBE Adherent人胆管癌细胞系
TYKnu细胞系相关产品:NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞
IPLB-SF 21细胞系相关产品:HITT15细胞、RIN Cl-5F细胞、CLL-CII细胞
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