"HCCLM3 Adherent高转移人肝癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HCCLM3 Adherent高转移人肝癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
我常看到一个比较复杂的四步消化法，这个挺有意思，我也是次听说，应该是网友自己发展出来的方法，很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近３００株细胞里面，还没遇到这么怪异的。比如Caco２其实是很好消化的细胞，不需要胰酶孵育即可，只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好，这个视细胞而定。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好；比较难消化的细胞(润洗方法５min还不能消化)，就以colon cancer为例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
AN3CA细胞系相关产品：MB 157细胞、C6661细胞、Rat podocyte细胞
H-2198细胞系相关产品：KMS-11细胞、NCCIT细胞、JJN-3细胞
GM-3573细胞系相关产品：CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MC-4细胞系相关产品：SUIT2细胞、PTK-2细胞、CAL-85-1细胞
10T1/2细胞系相关产品：BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
9L细胞系相关产品：ZYM-DIEC02细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、HCC1008细胞
细胞生长特性：贴壁生长
HCCLM3 Adherent高转移人肝癌细胞系
细胞形态特性：上皮样
接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。
U118细胞系相关产品：HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞
HFL-1细胞系相关产品：CCRF-SB细胞、RCC10RGB细胞、H196细胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞系相关产品：Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞
MCA 38细胞系相关产品：MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞
RPMI-7951细胞系相关产品：HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
MM-1S细胞系相关产品：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
H82细胞系相关产品：FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
Hs695细胞系相关产品：NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
NTera 2/cl.D1细胞系相关产品：H-1155细胞、OVCAR432细胞、ssMCF-7细胞
EAHY-926细胞系相关产品：TCCPAN2细胞、RMS13细胞、RKOAS451细胞
Panc 4.03细胞系相关产品：WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞
OCI-AML3细胞系相关产品：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞
HCCLM3 Adherent高转移人肝癌细胞系
HUV-EC-C细胞系相关产品：B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞
WEHI-231细胞系相关产品：NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞
OCI-AML-5细胞系相关产品：SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞
OCI-AML-5细胞系相关产品：SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞
N-2a细胞系相关产品：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞
MPC11细胞系相关产品：GalK 1细胞、H1238细胞、CF-PAC1细胞
McG-1细胞系相关产品：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
Hs 863.T细胞系相关产品：CHO-Lec1细胞、A431细胞、WEHI-231细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
H-3255细胞系相关产品：HT 1080细胞、RL95细胞、B16-F10--RED细胞
HuNS1细胞系相关产品：HHFK细胞、MPASMC细胞、ACHN细胞
U-343-MG细胞系相关产品：OUMS-27细胞、CMT 93细胞、H1568细胞
TT细胞系相关产品：IEC 6细胞、no.11细胞、GM04154B细胞
FHs74Int细胞系相关产品：D341细胞、KP-N-RT-BM细胞、CAL85-1细胞
JIMT-1细胞系相关产品：TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
OVCAR 420细胞系相关产品：Panc 02.03细胞、GM01232细胞、Hs675T细胞
NCI.H23细胞系相关产品：KYSE450细胞、751细胞、AG06814-J细胞
P3JHR1细胞系相关产品：CEMC7细胞、ECC-10细胞、JB6Cl30细胞
HeLa/DDP细胞系相关产品：COLO 320细胞、KATO 3细胞、L-6 myoblast细胞
Jijoye细胞系相关产品：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞
Neuro 2a细胞系相关产品：A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞
Hs-695-T细胞系相关产品：H226细胞、JB6 Cl 30细胞、OVCA-420细胞
SCH细胞系相关产品：SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞系相关产品：FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞
Daoy细胞系相关产品：KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞
NBL-S细胞系相关产品：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
NK-92细胞系相关产品：WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞
OCILY10细胞系相关产品：HLF-a细胞、RSMC细胞、C3H10T1/2 clone8细胞
Ramos(RA1)细胞系相关产品：IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞
Hep3B细胞系相关产品：P3J-HR-1细胞、OCI-AML3细胞、IPI-2I细胞
RERFLCMS细胞系相关产品：DI TNC-1细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞
LN299细胞系相关产品：Rat1细胞、ROS 17/28细胞、EB-1细胞
SW-527细胞系相关产品：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
SUM 149PT细胞系相关产品：3-LL细胞、SHEE细胞、PE CA PJ34细胞
PANC0327细胞系相关产品：3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
mousepodocyte细胞系相关产品：HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞
HCC95细胞系相关产品：RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
MB39细胞系相关产品：Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
NCI-H1836细胞系相关产品：GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞
Ca-Ski细胞系相关产品：LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞
HCCLM3 Adherent高转移人肝癌细胞系
Hs 888.Lu细胞系相关产品：HT细胞、PL12细胞、P3J细胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞系相关产品：SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞系相关产品：Okayama University Medical School-27细胞、H929细胞、SW480E细胞
HCC-2108细胞系相关产品：Human Embryonic Skin细胞、N-9细胞、KYSE-520细胞
H-211细胞系相关产品：SUM 190细胞、HT1197细胞、CEM C7细胞
MSTO211H细胞系相关产品：NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞
D341 Med细胞系相关产品：A172细胞、ZR-75-30细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞
RTE细胞系相关产品：ECC-1细胞、UACC 893细胞、H-250细胞
H1755细胞系相关产品：Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞
RPMI7951细胞系相关产品：SK-N-BE(2)-C细胞、MKN 45细胞、LN-229细胞
NCI.H23细胞系相关产品：KYSE450细胞、CCD841CoN细胞、NCIH2342细胞
HAEC细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney 21细胞、BC-025细胞、CMT-167细胞
"