786-O 人肾透明细胞腺癌细胞系

"786-O 人肾透明细胞腺癌细胞系
细胞背景资料：该细胞源自一位原发性肾透明细胞癌患者。该细胞有微绒毛和桥粒，能在软琼脂上生长。此细胞生成一种PTH（甲状旁腺素）样的多肽，与乳癌和肺癌中生成的肽相似，其N端序列与PTH相似，具有PTH样活性，分子量为６０００D。 
细胞形态：上皮细胞样 
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
786-O 人肾透明细胞腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
786-O 人肾透明细胞腺癌细胞系
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。 
细胞形态特性：上皮样 
MCF-7ADR细胞系相关产品：Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞 
CCD-1095Sk细胞系相关产品：SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞 
BCPAP细胞系相关产品：NCCIT细胞、X63-AG 8.653细胞、COLO-357细胞 
UO31细胞系相关产品：MHH-CALL-2细胞、MV-4:11细胞、293 HEK细胞 
H.Ep.-2细胞系相关产品：SNU-886细胞、PLA802细胞、BT-B细胞 
NCIH2135细胞系相关产品：MES-SA-Dx5细胞、OE-21细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞 
H1963细胞系相关产品：SK Col 1细胞、GA-10 clone 4细胞、MCF-7/ADR细胞 
143BTK-细胞系相关产品：H9细胞、NCIH1770细胞、HCEC细胞 
RT 112细胞系相关产品：PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞 
3T3-A31细胞系相关产品：RBE细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、SupB15WT细胞 
U-251-MG细胞系相关产品：SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞 
MM134细胞系相关产品：H526细胞、SKOV-433细胞、KFB细胞 
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Cates 1B细胞系相关产品：KP2细胞、67NR细胞、A549细胞 
Rat-1细胞系相关产品：GM00215A细胞、MDA231细胞、KU-812-F细胞 
EOMA细胞系相关产品：P3/NSI/1-AG4-1细胞、OB2细胞、H-548细胞 
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HTR-8/SVneo细胞系相关产品：DV-90细胞、hCMEC/D3细胞、PC-12细胞 
138MG细胞系相关产品：TYKnu细胞、HEK293-EBNA1细胞、DrG细胞 
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SKN-SH细胞系相关产品：Hs606细胞、GOS-3细胞、B16-F0细胞 
Nb2细胞系相关产品：C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞 
NCI-SNU-520细胞系相关产品：SUM-159细胞、H-2029细胞、NCIH1770细胞 
SUDHL8细胞系相关产品：OCI Ly19细胞、N1E115细胞、GM05887细胞 
SUDHL-16细胞系相关产品：F-81细胞、Porcine Kidney-13细胞、NCIH1781细胞 
OC 316细胞系相关产品：SF-539 BT细胞、Nittby-Salford 1细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞 
TE 32.T细胞系相关产品：SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞 
GM05887A细胞系相关产品：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞 
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MCF-12A细胞系相关产品：LSC-1细胞、SKHEP-1细胞、EB-2细胞 
Panc2.03细胞系相关产品：AMJ2-C8细胞、U266BL细胞、C 6细胞 
SKMEL1细胞系相关产品：HL-60 Clone 15细胞、HCC1954BL细胞、CHO-Lec1细胞 
GM00637B细胞系相关产品：Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞 
TGBC11T细胞系相关产品：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞 
CF Pac1细胞系相关产品：bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞 
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Hs343T细胞系相关产品：Colon 26细胞、HPDLF细胞、FAO-1细胞 
LM6细胞系相关产品：NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞 
SK Mel28细胞系相关产品：USMC细胞、KU 812F细胞、RWPE-2细胞 
624 MEL细胞系相关产品：SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞 
MOLP-8细胞系相关产品：Hs 742.T细胞、HSC-4细胞、SNU475细胞 
C666-1细胞系相关产品：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞 
MDA-MB435细胞系相关产品：BHK-21细胞、Me-Wo细胞、NCI-H1238细胞 
COLO206细胞系相关产品：NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞 
COLO 699细胞系相关产品：TE671/RD细胞、UCD-MLA-144细胞、ZR-75-30细胞 
HCC15细胞系相关产品：FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞 
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HLE-SRA-01/04细胞系相关产品：Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞 
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NCI-H647细胞系相关产品：HCCLM6细胞、SPC-A-1细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞 
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BE(2)C细胞系相关产品：SUM 149PT细胞、NT2/D1细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞 
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M-07e细胞系相关产品：KP-2细胞、TGW-nu-1细胞、NCI-H2108细胞 
HT55细胞系相关产品：SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞 
L929(NCTC)细胞系相关产品：C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞 
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KB细胞系相关产品：T-ALL1细胞、H-2171细胞、SUM-159PT细胞 
L-M[TK-]细胞系相关产品：FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞 
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