AMV Reverse Transcriptase

概述：AMV Reverse Transcriptase （RT）是由大肠杆菌表达的重组禽类成髓细胞瘤逆转录酶。AMV RT是一个异源二聚体，由两个不同的亚基组成（alpha和beta亚基）。AMV RT 具有多种活性，包括RNA和DNA依赖的DNA polymerase活性、DNA-RNA解旋活性、序列特异的Mn2+依赖性内切核酸酶活性和RNase H (45~60°C)内保持活性，因此可逆转录含有大量二级结构的RNA。
特点：优化活性温度范围45~50°C 热稳定性高，逆转录温度可达60°C 高效合成长达13 kb的链cDNA 合成掺入修饰的核苷酸
应用：链cDNA合成，用于RT-PCR和实时RT-PCR;可提高反应温度降低二级结构对逆转录的影响;合成cDNA，用于克隆和表达研究;合成标记的cDNA探针;引物延伸法分析RNA
组份：一个活性单位是指在37°C、10分钟内将1 nmol dTMP合成掺入多聚的核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量
保 存 液 200 mM磷酸钾，2 mM DTT，0.2% (V/V) Triton X-100和50%（V/V）甘油（pH 7.2）
5XAMV RT 缓冲液 250 mM Tris-HCl（pH 8.5, 25°C），40 mM MgCl2，150 mM KCl，5 mM DTT
抑制剂 金属鏊合剂和无机磷酸盐。焦磷酸钠可降低AMV RT活性，但是当其浓度 ≤ 4 mM 时可增加全长cDNA的产量
失活温度 85°C加热5分钟