大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒实验原理[1]
大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成

大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA检测试剂盒产品优势[1]
1.品种齐全、质量可靠、灵敏度高、稳定性好、操作简便。
2.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3.重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
操作流程[1]
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50uL;
3.样本孔中加入待测样本50uL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100uL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350uL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50uL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50uL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
主要参考文献
[1] 崔彩云;杜永成;胡晓芸;李毅;吸烟对致敏大鼠气道组蛋白去乙酰化酶2及血清中白介素8表达的影响。《中华哮喘杂志(电子版)》