背景[1-3]
牛载脂蛋白C3(APO-C3)ELISA试剂盒运用双抗体夹心ELISA酶联免疫法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体样本中载脂蛋白C3(APO-C3）的含量。
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被牛载脂蛋白C3（apo-C3）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛载脂蛋白C3（apo-C3）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
牛载脂蛋白C3(APO-C3)ELISA试剂盒
操作步骤：
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
应用[4][5]
用于载脂蛋白A5、载脂蛋白C3及载脂蛋白A5/载脂蛋白C3比值与冠心病的关系研究
研究载脂蛋白A5、载脂蛋白C3及载脂蛋白A5/载脂蛋白C3比值与血脂水平、冠心病的发生及冠状动脉病变支数的关系,从而通过调节载脂蛋白浓度水平预防冠心病的发生和发展。
方法:本研究连续入选131名患者,依据冠心病的诊断标准分为冠心病组69名与非冠心病组62名,分别统计冠心病患者与非冠心病患者年龄、性别、体重指数（body mass index,BMI）及是否吸烟等情况,测定两组血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、TG、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）浓度,同时采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,Elisa）分别测定血清ApoA5、ApoC3浓度,并计算ApoA5/ApoC3比值。
分别统计两组基本资料有无统计学差异,按照TG水平进行危险因素分层,比较非冠心病组、冠心病组TG高值组、冠心病组TG正常值组中ApoA5、ApoC3、ApoA5/ApoC3比值有无差异;研究血清ApoA5、ApoC3、ApoA5/ApoC3比值与冠心病的发生、冠状动脉病变支数及各项指标的关系。
结果:1冠心病组与非冠心病组临床基本资料的比较:冠心病组与非冠心病组年龄、体重指数、有无吸烟、TC、HDL、LDL水平差异无统计学意义（P>0.05）。两组性别、TG水平差异有统计学意义（P<0.01）。
2冠心病组与非冠心病组载脂蛋白A5、载脂蛋白C3、载脂蛋白A5/载脂蛋白C3比值水平的比较:TG高值组和TG正常值组ApoA5/ApoC3比值、ApoA5浓度水平均低于非冠心病组,TG高值组ApoC3浓度水平明显高于非冠心病组（P<0.01）。TG高值组ApoA5/ApoC3比值、ApoA5浓度水平均低于TG正常值组,TG高值组ApoC3浓度水平明显高于TG正常值组（P<0.01）。
3不同冠心病病变支数组间载脂蛋白A5、载脂蛋白C3、载脂蛋白A5/载脂蛋白C3比值水平的比较:在冠心病组中,单支病变组患者血清ApoA5/ApoC3比值、ApoA5浓度水平总体均高于双支和三支病变组,血清ApoC3浓度水平总体低于双支和三支病变组,但差异无统计学意义（P>0.05）。
4多因素二元Logistic回归分析:TG是ApoA5/ApoC3比值、ApoA5浓度水平降低的独立危险因素（OR=0.043,95%CI（0.023,0.134）,Wald 19.650,SE 0.588,P<0.01;OR=0.039,95%CI（0.009,0.157）,Wald 20.641,SE 0.716,P<0.01）,TG是ApoC3浓度水平升高的独立保护因素（OR=9.084,95%CI（3.054,27.022）,Wald 15.736,SE 0.556,P<0.01）。
5载脂蛋白及其比值与TG、TC、HDL、LDL相关性分析:血清ApoA5/ApoC3比值、ApoA5与TG浓度水平呈负相关,ApoC3与TG浓度水平呈正相关,差异均有统计学意义（P<0.01）;血清ApoA5/ApoC3比值、ApoA5与TC、LDL浓度水平有负相关趋势,ApoC3与TC、LDL浓度水平有正相关趋势,但差异均无统计学意义（P>0.05）;血清ApoA5/ApoC3比值、ApoA5与HDL浓度水平有正相关趋势,ApoC3与HDL浓度水平有负相关趋势,但差异均无统计学意义（P>0.05）。
参考文献
[1]Emerging evidences for the opposite role of apolipoprotein C3 and apolipoprotein A5 in lipid metabolism and coronary artery disease.[J].Dai Wen,Zhang Ziyu,Yao Chun,Zhao Shuiping.Lipids in health and disease.2019(1)
[2]Aerobic exercise reduces triglycerides by targeting apolipoprotein C3 in patients with coronary heart disease[J].Yating Wang,Li Shen,Danyan Xu.Clinical Cardiology.2019(1)
[3]Aerobic exercise reduces triglycerides by targeting apolipoprotein C3 in patients with coronary heart disease.[J].Wang Yating,Shen Li,Xu Danyan.Clinical cardiology.2019(1)
[4]High‐Density Lipoprotein Subspecies Defined by Apolipoprotein C‐III and Subclinical Atherosclerosis Measures:MESA（The Multi‐Ethnic Study of Atherosclerosis）[J].Sarah A.Aroner ScD,Manja Koch PhD,Kenneth J.Mukamal MD,Jeremy D.Furtado ScD,James H.Stein MD,Matthew C.Tattersall DO,MS,Robyn L.McClelland PhD,Majken K.Jensen PhD.Journal of the American Heart Association.2018(6)
[5]吴美美.载脂蛋白A5、载脂蛋白C3及载脂蛋白A5/载脂蛋白C3比值与冠心病的关系[D].承德医学院,2020.