背景[1-3]
蛋白胨水培养基用于鉴别细菌能否产生靛基质的生化反应(GB4789.4－2010，GB/T4789.38－2008，《中华人民共和国药典》2010年版和SN0169-92)。
靛基质（Indole）试验是指吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。靛基质试验用来检测吲哚的产生，可用于肠道杆菌的鉴定。
蛋白胨水培养基
各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用。用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生化反应。
将被检菌接种到蛋白胨培养基中，36±1℃培养18h～24h后，沿试管壁滴加数滴吲哚试剂于培养物液面，观察结果。出现红色者为阳性，出现黄色者为阴性。
大肠杆菌能分解蛋白质中的色氨酸，产生靛基质(吲哚)，靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成玫瑰色靛基质(红色化合物),为阳性结果。
原理：蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；含有色氨酸酶的细菌，能分解蛋白胨中的色氨酸，形成靛基质（吲哚）。靛基质无色，当加入对氨基苯甲酸试剂后，形成可见的红紫色醌式化合物，即玫瑰靛基质。
配方（每升）：胰蛋白胨：20g；氯化钠：5g；最终pH 7.4±0.2。
使用方法：
1、称取本品25g，加入蒸馏水或去离子水1 L，加热搅拌溶解煮沸至完全溶解，分装小试管，121℃高压灭菌15min。
2、挑取少量待检菌的新鲜纯培养物，接种至培养基中，于36±1℃培养24—48h。必要时可培养4—5d。
3、滴加(029030)靛基质试剂约0.5mL，覆盖于培养液表面，在两液接触处呈现玫瑰红色者为阳性反应，无红色者为阴性反应。
应用[4][5]
蛋白胨水培养基可以用于3种致病性弧菌选择性鉴别培养基的研制
主要围绕以下几个方面开展了一些工作：1霍利斯弧菌选择性鉴别培养基的研制基于霍利斯弧菌的基础营养和特殊生态环境需求,优化了其增菌培养基及培养条件。通过单因素试验结合响应面组合试验得到如下结果：培养基组成成分为混合蛋白胨2.11%(胰蛋白胨：鱼蛋白胨为1：1)、酵母浸膏0.210%、NaCl2.13%、pH7.5；培养温度为36土1℃。经过8h增菌后,该培养基的菌液浓度是GB/T4789.7-2008中规定方法的碱性蛋白胨水(APW)增菌菌液浓度的1.39倍,增菌效果明显。
以霍利斯弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的抵抗力为基础,设计研制了霍利斯弧菌选择性鉴别培养基(VhDM)。试验中对VhDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。
结果显示：VhDM对霍利斯弧菌具有较好的选择性和特异性；用VhDM在36±1℃培养16h-24h,霍利斯弧菌菌落为黄色；其它各种弧菌及非弧菌属致病菌菌落呈红色或未形成有效的可见菌落；VhDM对霍利斯弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(90.65±1.72)%；检出限为101cfu/mL:因此,VhDM对海产品中霍利斯弧菌分离鉴别与检测是可行的,且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。
2河弧菌选择性鉴别培养基的研制基于河弧菌的基础营养和特殊生态环境需求,优化了其增菌培养基及培养条件。通过单因素试验结合响应面组合试验得到如下结果：培养基组成成分为混合蛋白胨2.24%(胰蛋白胨：鱼蛋白胨为1：3)、酵母浸膏0.204%、NaCl1.81pH8.0；培养温度为36±1℃。经过8h增菌后,该培养基的菌液浓度是GB/T4789.7-2008中规定方法的碱性蛋白胨水(APW)增菌菌液浓度的1.59倍,增菌效果明显。以河弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的抵抗力为基础,设计研制了河弧菌选择性鉴别培养基(VfDM)。试验中对VfDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示：VfDM对河弧菌具有较好的选择性和特异性；用VfDM在36±1℃培养18h-24h,河弧菌菌落为深褐色；其它各种弧菌及非弧菌属致病菌菌落呈红色或未形成有效的可见菌落；VfDM对河弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(92.80±2.88)%；检出限为101cfu/mL;因此,VfDM对海产品中河弧菌分离鉴别与检测是可行的,且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。
3弗尼斯弧菌选择性鉴别培养基的研制基于弗尼斯弧菌的基础营养和特殊生态环境需求,优化了其增菌培养基及培养条件。通过单因素试验结合响应面组合试验得到如下结果：培养基组成成分为混合蛋白胨2.08%(胰蛋白胨：鱼蛋白胨为1：3)、酵母浸膏0.221%、NaCl1.94%、pH8.5；培养温度为36±1℃。经过8h增菌后,该培养基的菌液浓度是GB/T4789.7-2008中规定方法的碱性蛋白胨水(APW)增菌菌液浓度的1.48倍,增菌效果明显。以弗尼斯弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的抵抗力为基础,设计研制了弗尼斯弧菌选择性鉴别培养基(VfuDM)。试验中对VfuDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。
参考文献
[1]Rapid detection of Vibrio metschnikovii in aquatic products by real-time PCR[J].J.Cao;;J.Xu;;Q.Zheng;;P.Yan.Folia Microbiologica,2010(6)
[2]Simultaneous differential detection of human pathogenic and nonpathogenic Vibrio species using a multiplex PCR based on gyrB and pntA genes[J].C.S.J.Teh;K.H.Chua;K.L.Thong.Journal of Applied Microbiology,2010(6)
[3]Vibrio parahaemolyticus:A concern of seafood safety[J].Yi-Cheng Su;;Chengchu Liu.Food Microbiology,2007(6)
[4]Comparative evaluation of different chromogenic/fluorogenic media for detecting Escherichia coli O157:H7 in food[J].Mammad Manafi;;Birgit Kremsmaier.International Journal of Food Microbiology,2001(2)
[5]陈洁.3种致病性弧菌选择性鉴别培养基的研制[D].浙江工商大学,2012.