简述
N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-苄酯（Boc-Glu-OBzl）的分子式为C17H23NO6，分子量为337.37，常温常压下表现为白色固体粉末，可溶于氯仿、甲醇等有机溶剂。该物质是以L-谷氨酸为基本骨架的氨基酸衍生物，其结构中的叔丁氧羰基作为氨基的重要保护基团，在有机合成如固相肽合成 (SPPS)中已有广泛应用，其脱保护是通过三氟乙酸来实现的，这种方法具有反应时间短，产率高和适用范围广等优点[1]。
理化性质
密度: 1.198 g/cm3
熔点：95.0-99.0°C
沸点: 522.6℃ at 760 mmHg
闪点: 269.859℃
应用
关于N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-苄酯的应用报道并不多，我们探究N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-苄酯的应用价值，可将范围扩大至其上下游物质，例如未经BOC基团保护的L-谷氨酸 1-苄酯。以聚丙烯酰胺(PAM)为大分 子引发剂，采用开环聚合方法，在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中引发L-谷氨酸 1-苄酯环内酸酐(BLG-NCA)可聚合合成两亲性聚丙烯酰胺/聚L-谷氨 酸苄酯接枝共聚物(PAM-g-BLG)。用芘作荧光探针，研究该共聚物胶束的形成及其临界胶 束浓度(cmc)，利用动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)研究胶束的粒径分布和形态。结果表明，PAM能够引发BLG-NCA开环聚合得到接枝 共聚物，在一定条件下接枝共聚物能够形成球形的稳定胶束，cmc值和胶束粒径随着共聚物中疏水性聚L-谷氨酸苄酯(PBLG)链段含量的增加而减小[2]。
有关研究
为在大肠埃希菌中表达重组鲎血G因子，并检测其酶活性。根据大肠埃希菌偏好性优化G因子成熟肽编码序列，将G因子α亚基及β亚基克隆至原核表达载体pET32a-sumo上，分别构建pET32a-sumo/factorG-α及pET32a-sumo/factorG-β原核表达质粒，转化E. coli BL21(DE3)，IPTG诱导表达。产物经Ni-NTA亲和层析，SUMO蛋白酶切割融合伴侣，获得重组目的蛋白factorG-α及factorG-β。将二者等摩尔质量重组获得复合物G，以包含N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-苄酯片段的化合物Boc-Glu-(OBzl)-Gly-Arg-MCA为荧光底物检测其酶活性。结果经PCR及测序鉴定，重组质粒pET32a-sumo/factorG-α及p ET32a-sumo/factorG-β构建正确，表达蛋白均以包涵体的形式存在沉淀中，表达量占菌体总蛋白的30%及45%。纯化的factorG-α及factorG-β蛋白相对分子质量约为74 000和31 000，每1 L LB培养基酶切回收蛋白分别为0.7和1.7 mg。factorG-α及factorG-β蛋白与荧光底物几乎不反应，而复合物G可与荧光底物反应产生较高的荧光强度。上述实验即表明成功表达了具有酶活性的鲎血G因子，为进一步探讨鲎血G因子的生物学功能及新型真菌感染检测试剂盒开发奠定了基础[3]。
参考文献
[1]张敏杰,袁修华,马丽,等.硅胶催化的选择性去除N-Boc保护基[J].高等学校化学学报, 2007, 28(012):2330-2332.DOI:10.3321/j.issn:0251-0790.2007.12.042.
[2]吴秋华,魏天柱,梁芳,等.聚丙烯酰胺/聚L-谷氨酸苄酯接枝共聚物的合成及其胶束制备[J].高等学校化学学报, 2008, 29(8):5.DOI:10.3321/j.issn:0251-0790.2008.08.029.
[3]吴尚,黄慧,余华军,等.鲎血G因子的原核表达[J].中国生物制品学杂志, 2019(9):5.DOI:10.13200/j.cnki.cjb.002764.