介绍
羟基萘酚蓝（Hydroxynaphthol Blue，简称HNB）是一种重要的金属指示剂和生化试剂，其化学结构为三钠盐形式，分子式为 C₂₀H₁₁N₂Na₃O₁₁S₃。它的分子结构中包含萘酚衍生物和磺酸基团，使其具有良好的水溶性和金属络合能力。
羟基萘酚蓝
用于核酸定量检测
S1. 志贺氏菌ipaH基因的LAMP检测体系，总体积25μL，扩增容器为0 .2mL PCR扩增管。 其中羟基萘酚蓝浓度为8mmol/L，含有不同待测基因拷贝数的待测样液2μL，其余组分为浓度1×的ThermoPol缓冲液、0 .2μmol/L外引物F3和B3、1 .6μmol/L内引物FIP和BIP、1 .8mmol/L dNTP，0 .2mmol/L MgSO4，1mol/L甜菜碱，0.16U/μL Bst DNA聚合酶。
S2. 将扩增容器放入水浴锅中，63℃保温30min。
S3. 首先，将阴性质控样本的扩增容器放入仪器的样品孔2内，发光二极管的检测光线经过样品孔2 ，一部分被扩增容器、扩增溶液中的各组分吸收，其余部分进入光电传感器容置孔，被光敏电阻接收，光敏电阻与检测控制模块的模数转换模块连接，通过模数转换模块将光敏电阻的光信号转化为电信号，模数转换模块输出端与数据处理模块的输入端相连， 数据处理模块记录下第一个测得光强度值，将其记为初始光强度，然后数据处理模块继续获取下一次的光强度值，并在每一次获取光强度值后，以该值和初始光强度为参数，根据朗伯比尔定律计算光强度变化值，并将计算结果输出到结果显示模块。阴性质控样本后续测得的光强度与初始光强度相等，所以仪器测量数值为0，完成基于羟基萘酚蓝的核酸检测盒仪器调零。
S4. 将待测样的扩增容器放入仪器的样品孔2内，发光二极管的检测光线经过样品孔2，一部分被吸收，其余部分进入光电传感器容置孔，被光敏电阻接收，光敏电阻与检测控制模块的模数转换模块连接，通过模数转换模块将光敏电阻的光信号转化为电信号，模数转换模块输出端与数据处理模块的输入端相连，数据处理模块(STC5A60S2单片机)的输出端与结果显示模块(LCD1602液晶显示屏)的输入端相连；数据处理模块根据朗伯比尔定律对检测信号进行处理，并将基于羟基萘酚蓝的核酸检测盒检测结果输出至结果显示模块，记录检测数据[1]。
参考文献
[1]西北农林科技大学.一种基于羟基萘酚蓝指示剂色彩变化的核酸定量检测方法及仪器:202211227968.9[P].2024-04-09.