背景[1-3]
细胞刮刀采用热塑性弹性体（TPE）材质，对细胞的机械损伤极低，可最大程度保持细胞的活性和完整性。刀柄为ABS塑料制成，具备优良韧性，更耐弯折，适用于多种实验环境。
细胞刮刀表面是一个新型的细胞培养处理表面，增加了表面湿润的持久性和细胞吸附的稳定性超低吸附板的特征是共价结合的水凝胶层将细胞吸附、蛋白吸附和细胞的激活降到较低具有凝聚环的不可逆的盖减少污染，统一边角方便堆放带有字母单孔识别，平底经过细胞吸附化处理经过伽马射线灭菌，经过无热源认证。
细胞刮刀的刀片是由高分子材料TPE制成，长柄是由高分子材料ABS制成，主要是适用于收获细胞，其优化设计，确保对细胞损伤，并尽可能接触细胞生长的所有器皿表面。用于人工收获细胞，优化设计确保对细胞较小的伤害并尽可能接触细胞生长的所有表面。细胞刮刀常用于从培养皿中收获细胞。
细胞刮刀
产品特点：
1、改进的Falcon细胞刮刀以理性化设计最大可能的接触各种培养容器表面，较大程度的收获细胞；
2、横肋的聚苯乙烯（PS）手柄提供更大的刚性以更好控制来刮取细胞；
3、高柔性的热塑性弹性体（TPE）叶片提供多重角度，以保证从完整生长表面刮取细胞；
4、四种尺寸的细胞刮刀（刮匙）——不同的刀片和手柄长度，以满足用户的多方位需求；
5、独立无菌包装，易撕开，医疗级别包装，保证使用便利性和安全型。
细胞刮刀实验步骤：
无菌条件下取新生小牛大脑皮层灰质部，4℃D-Hank′s液洗涤4次，至无血迹残留。剪成1mm3左右的组织碎块并置于玻璃匀浆器内，加入两倍体积的MEM培养基，匀浆上下20次？匀浆液先用100目尼龙网布式漏斗抽滤，培养基洗涤4次，收集滤液。然后用200目尼龙网布式漏斗抽滤，MEM培养基洗涤4次。细胞刮刀收集200目尼龙网上的组织，将其置于离心管中，1500r/min离心洗涤10min。离心洗涤的脑微血管悬浮于的0.1%胶原酶中，旋涡振荡15sec以充分混匀，置于37℃恒温振荡水浴箱中振荡消化50min，取出后旋涡振荡15sec，1500r/min离心10min，弃上清，用20%BCS的培养基悬浮，接种于明胶铺被的培养瓶中，置于细胞培养箱中，37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养。静置5～7天后，可见少量细胞生长，20%BCS的MEM培养液换液，以后每2～3天换液一次，至细胞长成致密单层后可传代培养。
应用[4][5]
细胞刮刀可以用于人羊膜上皮细胞胞外囊泡对角膜碱烧伤的治疗作用及机制研究
人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cell,hAEC)具有双表面特性,它同时具有胚胎干细胞样分化能力和间充质干细胞样免疫调节特性,具有促进上皮再生、抗炎和抗纤维化的作用。细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是干细胞减轻炎症、改变细胞信号并促进组织损伤修复的关键机制和载体,它含有干细胞的活性成分,包括蛋白质、核酸和脂类等,可以作为一种无细胞替代疗法。此外,EVs促进组织再生和功能恢复的能力与其亲本细胞是一样的。
提取羊膜组织的有效成分人羊膜上皮细胞来源的细胞外囊泡(human amniotic epithelial cell-derived extracellular vesicles,hAEC-EVs),用于治疗兔角膜碱烧伤模型,观察其治疗效果,并探索其发挥治疗作用的相关机制;致力于研究hAEC-EVs的制剂,为角膜碱烧伤的临床干预提供新的方案。方法:第一部分:首先用胰酶/EDTA消化人羊膜组织,然后用细胞刮刀刮下hAECs,用hAECs培养基贴壁培养,通过显微镜镜检、细胞免疫荧光染色技术和流式细胞术对提取的hAECs进行鉴定。通过超速离心法从培养的hAECs上清液中分离出hAEC-EVs,然后用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、纳米颗粒追踪分析技术(nanoparticles tracking analysis,NTA)对hAEC-EVs的外观形态、粒径大小和分布范围进行鉴定,用蛋白免疫印迹法对其特征表达蛋白进行鉴定。
参考文献
[1]Desmosterol suppresses macrophage inflammasome activation and protects against vascular inflammation and atherosclerosis[J].Xinbo Zhang;Jeffrey G.McDonald;Binod Aryal;Alberto Canfrán‐Duque;Emily L.Goldberg;Elisa Araldi;Wen Ding;Yuhua Fan;Bonne M.Thompson;Abhishek K.Singh;Qian Li;George Tellides;Jose Ordovás-Montanes;Rolando García Milian;Vishwa Deep Dixit;Elina Ikonen;Yajaira Suárez;Carlos Fernández-Hernando.Proceedings of the National Academy of Sciences.2021
[2]Regenerative therapy for the Cornea.[J].Kumar Ajay;Yun Hongmin;Funderburgh Martha L;Du Yiqin.Progress in retinal and eye research.2021
[3]TGF beta?1,?2 and?3 in the modulation of fibrosis in the cornea and other organs[J].Wilson Steven E..Experimental Eye Research,2021(prep)
[4]Subconjunctival injection of mesenchymal stem cells for corneal failure due to limbal stem cell deficiency:state of the art[J].Galindo Sara;de la Mata Ana;López Paniagua Marina;Herreras Jose M.;Pérez Inmaculada;Calonge Margarita;Nieto Miguel Teresa.Stem Cell Research&Therapy.2021
[5]胡淑琴.人羊膜上皮细胞胞外囊泡对角膜碱烧伤的治疗作用及机制研究[D].同济大学,2022.