背景[1-3]
大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒用于测定血清，血浆及相关液体样本中大鼠前列腺素E1(PGE1)的含量。
大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒原理：应用双抗体夹心法测定标本中大鼠前列腺素E1(PGE1)水平。用纯化的大鼠前列腺素E1(PGE1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入样本及标准品，再与HRP标记的大鼠前列腺素E1(PGE1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠前列腺素E1(PGE1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠前列腺素E1(PGE1)浓度。
大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒
大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒使用前准备
1）标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。
2）洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
应用[4][5]
大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒可以用于炎症因子在前节内眼手术诱发血视网膜屏障破坏中的作用及机制研究
炎症因子在眼前节内眼手术诱发血-视网膜屏障破坏中的作用目的:研究炎症因子[前列腺素E1（PGE1）、前列腺素E2（PGE2）、前列腺素F2α（PGF2α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]在眼前节内眼手术诱发BRB破坏中的作用。
方法:1、大鼠动物模型房水和玻璃体中炎症因子浓度的检测:实验分对照组和模型组。大鼠造模后4h、1d、2d、3d、5d和7d采用酶联免疫吸附技术（大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒）检测大鼠动物模型房水和玻璃体中PGE1、PGE2、PGF2α、IL-1β和TNF-α的浓度。2、前房注射炎症因子对BRB的影响:实验分空白对照组、阴性对照组和炎症因子组。空白对照组大鼠未进行任何操作;阴性对照组用微量注射器大鼠前房穿刺注入10uL生理盐液;炎症因子组根据Elisa检测大鼠动物模型房水中PGE1、PGE2、PGF2α、IL-1β和TNF-α的浓度,大鼠前房分别注射PGE1、PGE2、PGF2α、IL-1β和TNF-α。注射后4h和48h后采用Elisa技术检测大鼠动物模型房水和玻璃体中PGE1、PGE2、PGF2α、IL-1β和TNF-α的浓度;采用Evans蓝作为示踪剂定量检测BRB的破坏程度。3、炎症因子拮抗剂抵抗炎症因子诱发的BRB破坏:PGE1、PGE2和PGF2α实验分为阴性对照组、模型组、NSAIDs预防治疗组、NSAIDs治疗组、皮质类固醇预防治疗组和皮质类固醇治疗组。每组各时间点各4只大鼠。阴性对照组大鼠用生理盐水眼液点眼,tid;模型组制造大鼠动物模型,用生理盐水眼液点眼,tid;NSAIDs预防治疗组制造大鼠动物模型,造模前2d开始用普南扑林眼液点眼,tid;NSAIDs治疗组制造大鼠动物模型,造模后开始用普南扑林眼液点眼,tid;皮质类固醇预防治疗组制造大鼠动物模型,造模前2d开始用百力特眼液点眼,tid;皮质类固醇治疗组制造大鼠动物模型,造模后开始用百力特眼液点眼,tid。IL-1β和TNF-α实验分为阴性对照组、模型组和治疗组。每组各时间点各4只大鼠。阴性对照组用微量注射器大鼠前房穿刺注入10uL生理盐液;模型组制造大鼠动物模型,然后用微量注射器向大鼠前房穿刺注入10uL生理盐液;治疗组制造大鼠动物模型,然后用微量注射器向大鼠前房穿刺分别注入IL-1β抗体和TNF-α抗体。造模后4h和48h后采用Elisa技术(大鼠前列腺素E1(PGE1)Elisa试剂盒)检测大鼠动物模型房水和玻璃体中PGE1、PGE2、PGF2α、IL-1β和TNF-α的浓度;采用Evans蓝作为示踪剂定量检测BRB的破坏程度。
参考文献
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[2]Preoperative ketorolac tromethamine 0.4%in phacoemulsification outcomes:Pharmacokinetic-response curve[J].Eric D.Donnenfeld;;Henry D.Perry;;John R.Wittpenn;;Renée Solomon;;Alanna Nattis;;Timothy Chou.Journal of Cataract&Refractive Surgery,2006(9)
[3]Intravitreal Triamcinolone Acetonide for Persisting Cystoid Macular Edema After Penetrating Keratoplasty[J].Jost B Jonas;;Bernd Kamppeter.Cornea,2006(2)
[4]Prophylaxis for pseudophakic cystoid macular oedema:a long way to go[J].Srinivas KRao;NingCheung;Dennis SCLam.Clinical&Experimental Ophthalmology,2006(4)
[5]谢茂松.炎症因子在前节内眼手术诱发血视网膜屏障破坏中的作用及机制研究[D].山东大学,2008.