常用溶液的配制方法:PBS、CBS和Tris缓冲液

2025/8/20 13:08:34 作者:帝企鹅

PBS 是phosphate buffer saline的缩写,中文通常称为“磷酸盐缓冲盐溶液”,更准确地译名应该是“磷酸盐缓冲生理盐水”,是生化实验广泛使用的一种缓冲溶液。通常是在PB的基础上加入0.9% NaCl,拥有和人体体液类似的渗透压和pH值。有时为了满足其它需求,需加入K+、Ca2+或Mg2+。这个时候就需要用到D-PBS(Dulbecco′s Phosphate Buffered Saline,杜氏磷酸盐缓冲盐水),相对于PBS,其中磷酸二氢钾浓度降低,避免与常见的钙离子Ca2+、Mg2+及一些重金属离子生成沉淀。

PBS缓冲液的配制

PBS的缓冲pH值范围非常广,可配置各种pH值的酸、碱、中性缓冲液,是最常见的缓冲体系之一。
配制酸性磷酸缓冲液可直接用NaH2PO4或KHPO,pH范围在1-5;
碱性缓冲液可直接用NaH2PO4或K2HPO4,pH范围在9-12;
中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4,溶液混合,pH在5.5-8.5。

以0.2mol/L中性磷酸缓冲液为例,不同摩尔浓度缓冲液加纯化水稀释即可(缓冲液的摩尔浓度指的是磷酸根的浓度,所以若稀释后pH值有微小变化需要调整,不要用带有磷酸根的溶液):磷酸氢二钠(Na2HPO4*,0.2mol/L):28.39g/L;磷酸二氢钠(NaH2PO4*,0.2mol/L):24g/L。配制100mLPBS缓冲液所用量如下图所示:

不同pH的PBS缓冲液配方

碳酸缓冲液(CBS)的配制

CBS一般由碳酸和碳酸氢钠配制,多为碱性。以0.2mol/L碳酸缓冲液为例,不同摩尔浓度缓冲液加纯化水稀释即可。碳酸钠(Na2CO3*,0.2mol/L):21.2g/L;碳酸氢钠(NaHCO3*,0.2mol/L):16.8g/L。配制50mL CBS缓冲液所用量如下图所示:

不同pH的CBS缓冲液配方

Tris-HCl缓冲液的配制

贮备液A:0.2 mol/L三羟甲氨基烷(Tris-ydroxy methyLamino methanne,C4H11NO3,24.2g配成1000ml);

贮备液B:0.2 mol/L盐酸(浓HCl 17.1ml配成1000ml)。

50ml ml A液 + x ml B液稀释至200ml

不同pH的Tris-HCl缓冲液配方

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