背景技术
盐酸培唑帕尼(Pazopanib Hydrochloride)，化学名为5‑[[4‑[(2,3‑二甲基‑2H‑吲唑‑6‑基)甲氨基]‑2‑嘧啶基]氨基]‑2‑甲基‑苯磺酰胺盐酸盐。盐酸培唑帕尼是第二代多靶点酪氨酸激酶抑制剂，对血管内皮生长因子受体、血小板源性生长因子受体等有明显的抑制作用。经文献检索，盐酸培唑帕尼的合成是由2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐和2,4‑二氯嘧啶缩合、再和3‑氨基‑6‑甲基苯磺酰胺缩合、最后成盐得盐酸培唑帕尼。2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐是合成盐酸培唑帕尼的关键物料。
中国专利CN107991398A提到2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐的含量检测方法，但并未说明如何进行杂质的分离检测，且未指明杂质结构。2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐中所存在的杂质均是极性较大的杂质，普通的C18色谱柱是无法有效分离这些杂质，对于该物质的杂质控制并没有相应的分析检测方法，因此，为不断提高药品的安全性和有效性，迫切需要建立一种操作简便、灵敏度高、重现性好的有关物质检测方法。
检测方法[1]
高效液相色谱仪：岛津LC‑2030plus；色谱柱：Waters HSS(4.6×250mm，3.5μm)；填料为waters生产的高强度硅胶颗粒；流动相包括流动相A和流动相B；流动相A为0.01mol/L乙酸盐缓冲液，流动相B为乙腈；检测波长：297nm；柱温：40℃；流速：1.0mL/min；
1、取2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐样品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1mL含0.3mg的供试品溶液；
2、取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D对照品适量，加乙腈溶解并稀释制成杂质A对照品储备液、杂质B对照品储备液、杂质C对照品储备液、杂质D对照品储备液；所述各杂质对照品储备液中，杂质对照品和乙腈的用量比均为75μg：1mL；
3、取各杂质对照品储备液适量，加溶剂稀释制成各杂质对照品溶液；所述各杂质对照品溶液中，杂质对照品和溶剂的用量比均为1.5μg：1mL；
4、分别取各杂质对照品储备液适量、2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐样品适量，加溶剂溶解并稀释制成混合样品溶液；所述混合样品溶液中，2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐样品和溶剂的用量比为0.3mg：1mL，各杂质对照品和溶剂的用量比均为1.5μg： 1mL；
5、设置流动相流速为1mL/min，检测波长为297nm，柱温为40℃；
6、取各杂质对照品溶液、混合样品溶液和供试品溶液各20μL注入高效液相色谱仪；
结果
主成分2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐保留时间为16.668min，杂质A保留时间为48.823min， 杂质B保留时间为41.837min，杂质C保留时间为42.850min，杂质D保留时间为15.383min，各 杂质及主成分峰的分离度均大于1.5，拖尾因子均小于1.5，说明该结果稳定可靠。
参考文献
[1]海南鑫开源医药科技有限公司. 一种2,3-二甲基-6-氨基-2H-吲唑盐酸盐的检测方法:CN202111628809.5[P]. 2022-03-25.