RAMAGE 链接剂的一种改进制备方法

背景技术

RAMAGE 链接剂化学名称为(R,S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基)二苯并[A,D]环庚烷-2-基]氧]乙酸，是一种有效的固相合成C-端链接剂，相对于其他多肽链接切割条件温和。现有技术中，存在反应步骤多，后处理麻烦，三废多，生产成本较高的技术缺陷。

制备方法^[1]

A、将500g邻羧基苯甲醛与553g间甲氧基苯乙酸混合,加入600g醋酸钠,于5L三口瓶中搅拌,升温至200C反应9小时。降温,反应物用水溶解5%HCl酸化，乙酸乙酯萃取,负压蒸去溶剂,用2.5L甲醇溶解反应物,加入35g Pd-C,通氢气,30℃下搅拌2小时,抽滤,减压蒸干溶剂,用1L乙酸乙酯溶解,加入2L石油醚重结晶,抽滤得(R-1)645g,产率77%,熔点140~143℃,HPLC 98.91%;

B、将100g(R-1)与SOCl₂ 232克在60℃反应3小时,负压蒸干过量的SOCl2,残余物用400mL苯溶解,滴加在溶有160g无水AlCl3的1200mL无水苯溶液中,60℃回流24小时,再用水洗,减压蒸干溶剂,残留物用150mL醋酸乙酯溶解,加入300mL石油醚重结晶,抽滤得(R-2)70g,产率80%,熔点140-141℃,HPLC99%;

C、将100g(R-2)用DMF溶解,降温到0℃,加入60g叔丁醇钾,在室温下搅拌10分钟，加入145g BrCH2CH2OOCH2C6H5,升温至90℃,继续搅拌6小时。后干蒸溶剂,残留物用乙酸乙酯溶解,饱和食盐水洗,无水硫酸钠干燥,蒸干溶剂；用乙酸乙酯-石油醚重结晶,得目标产物(R-3)146g,产率88%,HPLC98.1%;

D、将100g(R-3)用600mL甲醇溶解,加入7gPd-C,通H2温度保持30℃,持续3小时,抽滤去催化剂,负压蒸干溶剂，不处理直接得到(R-4)粗品;

E、将上步(R-4)用DMF溶解,加入64g Fmoc-NH₂，3.9g PTS。溶液搅拌18小时后升温到90℃继续搅拌2小时,加水稀释,用乙酸乙酯萃取,有机层10%柠檬酸水酸化到PH=3-4,再用饱和食盐水洗,有机相用无水硫酸钠干燥,蒸干溶剂,残留物用甲醇310毫升重结晶,得目标产物RAMAGE 链接剂102g，以(R-3)计算产率为75.6%，HPLC 98.1%，熔点220.5-222.2℃。

参考文献

[1]吉尔生化(上海)有限公司,上海吉尔多肽有限公司. (R,S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基)二苯并[A,D]环庚烷-2-基]氧]乙酸的制备方法:CN201510107760.7[P]. 2015-07-08.