介绍
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)Elisa试剂盒为双抗夹心法ELISA试剂盒,定量检测血清、血浆、组织匀浆样本中的CSF2含量。试剂盒检测范围为15/6 pg/ml- 1000 pg/ml,灵敏度为3.9 pg/ml。适用于科研领域中对大鼠感染性疾病模型、免疫调控机制、造血功能研究以及药物干预效果的评价。可满足体外实验中GM - CSF的动态监测需求。
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)Elisa试剂盒
检测原理
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)Elisa试剂盒通过特异性抗体结合与酶促显色实现 Rat G-CSF 的定量,具体流程如下:微孔板预先包被抗 Rat G-CSF 特异性抗体,加入标准品 / 样本后,样本中的 G-CSF 与固相抗体特异性结合,形成固相抗体-G-CSF复合物;去除未结合物质后,加入生物素偶联的抗Rat G-CSF二抗,该二抗与复合物中的G-CSF结合,形成固相抗体-G-CSF-生物素抗 三元复合物;加入亲和素偶联的辣根过氧化物酶(HRP),亲和素与生物素通过强特异性结合,构建稳定的抗体-G-CSF-生物素 - 亲和素 - HRP酶复合物;洗去未结合的游离酶试剂后,加入 TMB 底物,HRP 催化 TMB 发生氧化还原反应,生成蓝色产物;颜色深浅与样本中 G-CSF 浓度呈正相关;加入酸性终止液(如硫酸)后,蓝色转为黄色,通过酶标仪测定 450 nm 吸光度,结合标准曲线计算样本中 G-CSF 的实际浓度[1]。
样本处理规范
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)Elisa试剂盒处理不同类型样本时,流程需严格遵循以下步骤,避免 G-CSF 降解或污染。用血清分离管(SST)收集大鼠全血,室温静置 2 小时或 4℃过夜使血液凝固,随后在 2-8℃、1000×g 条件下离心 15 分钟,取上层血清;可立即检测,或分装后 - 20℃(≤1 个月)/-80℃(≤2 个月)保存,避免反复冻融。以 EDTA 或肝素为抗凝剂,采集全血后 30 分钟内,在 2-8℃、1000×g 条件下离心 15 分钟取血浆;保存方式同血清,解冻后需再次离心(1000×g,5 分钟)去除沉淀。收集细胞培养上清后,在 2-8℃、1000×g 条件下离心 15 分钟去除悬浮细胞和碎片;立即检测或分装冻存(同血清),避免细胞代谢产物干扰[2]。
参考文献
[1]Desai D ,Sampat P ,Mammadli M , et al.Effect of Granulocyte Colony Stimulating Factor (GCSF) on Survival in Patients with Acute Myeloid Leukemia (AML)[J].Blood,2024,144(S1):5990-5990.
[2]Liu Q ,Zhu X ,Yan X , et al.Therapeutic and Mechanistic Effects of Granulocyte Colony Stimulating Factor and Neurotrophin Receptor on Cerebral Ischemia-Reperfusion Injury: An Experimental Pilot Study.[J].Annals of clinical and laboratory science,2024,54(4):474-482.