概述
Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit中文名称为人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)酶联免疫试剂盒，是一种特异性检测妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)的分析检测试剂。作为一种最早在孕妇血清中发现的高分子量的黏多糖蛋白，血浆蛋白-A主要用于高危妊娠的产前筛查。随着分子生物学技术的发展和对子宫，卵巢分子水平的深入研究，人们发现，它不但存在于孕妇血清中，也存在于子宫内膜基质细胞，蜕膜细胞及卵巢颗粒细胞，卵泡液中[1]。因此，能够对该物质实现快速检测分析的Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit的发展研究具有重要意义。
应用原理
Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit应用双抗体夹心法测定标本中人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)水平。用纯化的人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)抗体包被微孔板，制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)，再与HRP标记的妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算即可分析得到样品中人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的含量[2]。
生产研究
由上述应用原理可知，人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)抗体是Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit的关键组分。因此，开展该类抗体的生产研究具有重要意义。在该背景之下，研究人员采用杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗PAPP-A单抗的细胞株，将细胞株扩大培养并亲和纯化上清液获得抗体，测定抗体纯度，效价，特异性，表位，建立了双抗体夹心CLIA及胶体金体系，并对各体系进行灵敏度，特异性等分析性能评估。结果发现，细胞株分泌的抗体效价均大于10-8 g/ml，化学发光体系在0～10000 ng/ml范围内线性关系良好，其准确度的回收率为107.2%，灵敏度为9.56 ng/ml，线性相关系数为0.9966，低高值的变异系数(CV)均小于10%，胶体金体系灵敏度不小于50 ng/ml。该体系不仅为Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit的生产与优化提供了新的抗体选择，也为PAPP-A的定量检测和产前诊断等临床应用提供了又一研究基础[3]。
参考文献
[1]邓莲,章晓梅,李春华.妊娠相关血浆蛋白-A在卵泡发育中的作用[J].中华妇产科杂志, 2004, 39(2):3.DOI:CNKI:SUN:ZHFC.0.2004-02-018.
[2]中国化工仪器网.人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)酶联免疫分析[J].试验机.
[3]张兰兰,于洋,曹领改,等.抗人妊娠相关血浆蛋白A单抗的制备,鉴定及化学发光和胶体金检测体系的建立[J].中国免疫学杂志, 2020, 36(22):6.DOI:10.3969/j.issn.1000-484X.2020.22.013.