背景技术
5-硝基间苯二甲酸二甲酯,又称5-硝基异酞酸二甲酯,分子式为C10H7NO6,英文名称为Dimethyl-5-nitroisophthalate(DM-NIP)。5-硝基间苯二甲酸二甲酯是一种精细化工中间体,主要用于医药、胶片、纤维、皮革等行业,也可用作医用X-胶片的显影剂、补色抑制剂等。
5-硝基间苯二甲酸二甲酯具有水溶性大、粘度小、渗透压低等优点,可用来合成诊断用药碘酞酰胺,用于心血管、腹主动脉、肾盂、脑血管等造影,也可以用来合成非离子型X-CT造影剂碘海醇。关于5-硝基间苯二甲酸二甲酯的制备很早就有文献报道,目前工业制备主要由5-硝基间苯二甲酸(5-Nitro-iso-phthalate,NIP)与甲醇在H2SO4存在下酯化而得，尚无生物来源报道。
制备方法[1]
1)浸膏的制备:将黑曲霉孢子粉用丙酮以1:4的重量比,在温度75℃,压力0.5MPa条件下提取3次得黑曲霉提取液,时间为每次3h,并将该提取液采用旋转蒸发仪在温度50℃、压力为0.05MPa的条件下旋蒸至有机溶剂挥干,得浸膏;
2)硅胶柱层析:用石油醚湿法装柱得到硅胶层析柱,将步骤(1)中的浸膏用丙酮溶剂溶解并与尺寸为250目的硅胶拌样,挥干溶剂后干法上样;依次按石油醚:丙酮=1:0、40:1、20:1、10:1.5:1.2:1.1:1和0:1进行洗脱,分段收集洗脱液,薄层层析跟踪检测,合并相同组分,采用旋转蒸发仪在温度50℃、压力为0.05MPa的条件下旋蒸至有机溶剂挥干;
3)反向柱层析:选取步骤(2)中极性适中浓缩组分用丙酮溶剂溶解与尺寸为250目的硅胶拌样,挥干溶剂后湿法上反向硅胶柱,并依次按纯净水:丙酮=100:0、90:10、80:20、70:30、60:40、50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100进行洗脱,分段收集洗脱液,薄层层析跟踪检测,合并相同组分，采用旋转蒸发仪在温度50℃、压力为0.05MPa的条件下旋蒸至有机溶剂挥干;
4)Sephadex LH-20凝胶柱层析:将步骤(3)中成点性较好的浓缩组分用氯仿:甲醇重量比为1:1的溶剂溶解,上氯仿:甲醇重量比为1:1的凝胶柱,按氯仿:甲醇=1:1进行洗脱,收集洗脱液,薄层层析跟踪检测,合并相同组分，采用旋转蒸发仪在温度50℃、压力为0.05MPa的条件下旋蒸至有机溶剂挥干,得5-硝基间苯二甲酸二甲酯粗品;
5)再次硅胶柱层析:将步骤(4)中目标粗品再次进行硅胶柱处理;并按环已烷:丙酮=3:1进行洗脱,收集洗脱液,薄层层析跟踪检测,合并相同组分，TLC层析显示为单一组分,浓缩干燥得微黄色粉末,即得5-硝基间苯二甲酸二甲酯。
参考文献
[1]贵州大学. 一种利用黑曲霉分离提取5-硝基间苯二甲酸二甲酯的方法:CN201810818225.6[P]. 2018-10-16.