人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa试剂盒是一种特异性测定人血清、血浆及相关液体样本中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量的生物试剂盒。人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。

图1 人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa试剂盒测试结果示意图
实验原理
人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa试剂盒基于双抗体夹心两步法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,实验在预先包被了抗人ANG-Ⅱ抗体(固相抗体)的微孔板中进行:依次加入人ANG-Ⅱ校准品或待测样本、生物素标记的检测抗体,经温育与洗涤后,再加入HRP标记的亲和素;再次温育并彻底洗涤以去除未结合物质后,最终在固相表面形成“固相抗体-抗原-生物素化抗体-酶标亲和素”的复合物。随后加入显色底物TMB,在辣根过氧化物酶(HRP)催化下产生蓝色产物,经终止液作用后最终转为黄色。该黄色在450 nm波长下的吸光度(OD值)与样品中人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)的浓度呈正相关,通过拟合校准品曲线即可准确定量样本中ANG-Ⅱ的含量。该人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa试剂盒通过上述稳定可靠的检测流程,确保结果的准确性与重复性。[1]
限制性
人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa试剂盒仅限于科研用途,不可用于临床诊断,且必须在标示的有效期内并使用配套样品稀释液进行操作。如样本测定值超出标准曲线上限,建议适当稀释后重测;需注意待测样本中若存在人抗鼠等异嗜抗体可能干扰结果,实验前应予以排除。此外,采用其他检测方法所得结果与本人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)Elisa试剂盒的测定数据不具直接可比性。
参考文献
[1] Chappell M C, Pirro N T, South A M, et al. Concerns on the specificity of commercial ELISAs for the measurement of angiotensin (1–7) and angiotensin II in human plasma[J]. Hypertension, 2021, 77(3): e29-e31.