鬼箭羽饮片中香橙素的定量方法

2025/12/25 14:41:44 作者:南星

鬼箭羽为卫矛科卫矛属植物卫矛的带翅嫩枝或枝翅,具有破血、通经、杀虫等功效,主治妇女经闭、产后淤血腹痛、虫积腹痛等症。近二十年研究发现鬼箭羽单味药或复方具有良好的降糖作用,也在细胞实验中发现从降糖有效部位中分离得到的山奈酚、槲皮素能够增加脂肪细胞糖摄取并进行了机理研究。由于鬼箭羽传统以水煎入药,为继续寻找降糖有效成分,对极性较大的乙酸乙酯部位和水部位的化学成分进行了研究,从乙酸乙酯部位分得香橙素、表木栓醇、原儿茶酸、β-谷甾醇,从水部位分得槲皮素及芦丁。

香橙素((2R,3R)-(+)-Aromadendrin)为乙酸乙酯部位分离出的代表性成分(占该部位的质量百分比为0.058%),为二氢黄酮类化合物,具有消除氧自由基、抗前列腺増生、抗病毒等作用,且无细胞毒活性。香橙素的化学名称3,5,7,4'- 四羟基黄烷酮,为白色至微黄色固体,不溶于水,可溶于DMSO等有机溶剂。香橙素还可以从紫荆花、含生草等植物中提取,也可通过柑橘类水果的果皮提取获得。本文以香橙素为指标,建立了鬼箭羽中香橙素的高效液相色谱含量测定方法,并测定不同产地的鬼箭羽中香橙素含量。

香橙素

检测方法[1]

1、色谱条件

色谱柱: Kromasil 100-5C18(4.6mmx250mm,5um);流动相:乙腈-0.3%冰醋酸(24 : 76);柱温:30℃;流速:1.0mL/min;检测波长:292nm;进样量:5uL;系统适用性:理论塔板数不低于3000。

2、对照品溶液的制备

精密称定香橙索对照品5.1mg于25mL的容量瓶中,加甲醇溶解稀释至刻度,制成每1mL含香橙素0.204mg的溶液。

3、供试品溶液的制备

取鬼箭羽粉末(60目筛)样品约5g,精密称定,置250mL圆底烧瓶中,加入50mL乙酸乙酯回流提取1h,过滤,减压回收溶剂,残渣加甲醇溶解,并转移至5mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用0.45um微孔滤膜滤过,即得。

4、线性关系考察

精密吸取对照品溶液0.25mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、2.5mL、5.0mL,于10mL的容量瓶中,加甲醇稀释至刻度得5ug·mL-1、10 ug·mL-1、20ug·mL-1、40ug·mL-1、50ug·mL-1、100ug·mL-1溶液,分别精密吸取上述溶液10uL,按照色谱条件测定峰面积。以峰面积值为纵坐标,香橙素进样量(ug)为横坐标,得回归方程:y=1226.6x+17.015,r=0.9999。实验结果显示,香橙素在0.051~2.04ug范围内,对照品浓度和其峰面积具有良好的线性关系。

5、精密度试验

精密吸取香橙素对照品溶液(40ug·mL-1)5uL,按上述色谱条件重复进样6次,记录香橙素的峰面积,其RSD为0.13%,表明仪器精密度良好。

6、稳定性试验

取11号样品粉末(60目)5g,精密称定,按步骤3下方法制备供试品溶液,精密吸取5uL,按上述色谱条件分别于0、2、4、8、12、24、48h进样,测定峰面积,RSD为2.7%。表明供试品溶液在48h内稳定。

7、重现性试验

取11号样品5g,精密称定,共6份,按步骤3下方法制备供试品溶液,精密吸取5uL,注入高效液相色谱仪,测定峰面积,平均含量为0.0256mg·g-1,RSD为0.12%。测定结果表明香橙素含量测定重现性良好。

8、加样回收率试验

精密称取已知含量的4号鬼箭羽样品(60目)9份,各2.5g,精密加入一定量的0.2mg·mL-1的香橙素对照品溶液,按供试品溶液制备方法操作,测定峰面积,计算平均加样回收率。

9、样品测定

精密称取20个不同产地的鬼箭羽样品粗粉各5g,按步骤3项下方法制备供试品溶液,进样5uL,在上述色谱条件下进行测定,根据回归方程计算香橙素的含量,测定结果见下表,其中6批以枝为主的样品由于香橙素含量过低未测出。

不同产地的鬼箭羽样品中香橙素含量

参考文献

[1] 陈云华,龚慕辛,张超,等. 鬼箭羽饮片中香橙素含量的HPLC测定[C]//中国定西第三届中医药产业发展大会、第二届全国中药商品学术大会、中国中药商品产业发展定西论坛论文集. 2010:55-59.

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