前言
磷脂酰胆碱(大豆)，又称卵磷脂或胆碱磷脂，是生命活动的基础物质。它与其它磷脂成分如磷脂酰乙醇肢(PE)、磷脂酸(PA)与肌醇磷脂(PI)等，以混合物形式广泛存在于动植物和人的细胞膜与卵细胞中。磷脂酰胆碱(大豆)是一种天然的表面活性剂，在食品加工中起乳化、润湿、分散和脱模等作用。高纯度的磷脂酰胆碱(大豆)既可以利用其表面活性作为药物制剂的辅料，也可加工成功能性食品，具有促进脂肪代谢，防止出现脂肪肝，降低胆固醇，改善血液循环，防止心血管疾病，促进神经传导，提高大脑记忆力等功能。近年来，磷脂酰胆碱(大豆)的药用价值越来越凸现，因此对高纯度磷脂酰胆碱(大豆)的需求趋旺。但是，目前我国高纯度的磷脂酰胆碱(大豆)主要从国外进口，价格昂贵。因此，研究制备高纯度的磷脂酰胆碱(大豆)有重要意义。
纯天然的磷脂酰胆碱(大豆)主要从豆类及豆类制品中获取。其中，大豆油脂加工过程中产生的大豆磷脂经干燥等简单处理得到的大豆浓缩磷脂是提取磷脂酰胆碱(大豆)的主要原料。
提纯磷脂酰胆碱(大豆)的方法主要有溶剂提取法、超临界流体萃取法、醇催化精制法、膜分离法和柱层析法等。其中，柱层析法分离效果好，操作简单，易于实现工业化，因而成为目前磷脂酰胆碱(大豆)提纯的主流方法。层析柱的固定相分为氧化铝与硅胶两大类。由于氧化铝柱不能再生，无法重复使用，硅胶成为最佳的吸附剂。流动相多种多样，以氟仿/甲醇/水和正己烷/异丙醇/水两种体系为主，鉴于氧仿毒性大、易造成环境污染等，宜采用正己烷/异丙醇/水体系。
本文采用硅胶为吸附剂，正己烷/异丙醇/水为流动相的柱层析法，以产品中磷脂酰胆碱(大豆)的纯度和回收率为目标，得到了最适的固定相、流动相配比和上载量等主要的工艺参数。
提纯方法[1]
1、样品制备
取10g大豆浓缩磷脂于100mL烧杯中，加入40mL流动相，室温下搅拌至溶解，于冰箱中放置过夜，备用。
2、硅胶柱的制备
取经活化的25g粗孔2号硅胶，加入流动相制成浆状，湿法装柱，然后用流动相平衡层析柱。
3、磷脂的分离
将制备好的样品缓缓倒入柱中，进样完毕后加入流动相洗脱。控制空塔流速为0.382cm·min-1，分步收集流出液，TLC定性分析，合并富含磷脂酰胆碱(大豆)部分的组分作为层析产品。
柱层析提纯大豆磷脂的适宜工艺条件为:在空塔流速为0.382cm·min-1，进样浓度为0.25g浓缩磷脂·(mL流动相)-1的室温条件下，固定相选用100~200目粗孔2号硅胶，流动相为正己烷:异丙醇:水(1:1:0.16, v/v/v)，最适上载量为0.086g磷脂酰胆碱(大豆)(g硅胶)-1，产品中磷脂酰胆碱(大豆)纯度高达85%。
参考文献
[1] 张颖颖,杨亦文,任其龙,等. 硅胶柱层析法提纯大豆磷脂酰胆碱的研究[J]. 高校化学工程学报,2006,20(5):685-690. DOI:10.3321/j.issn:1003-9015.2006.05.003.