简介
前期研究发现昔美酸沙美特罗能降低Ⅱ型糖尿病SD大鼠的血糖，后进行分子动力学研究发现其与PPARγ受体结合度比较高。因此研究人员通过建立胰岛素抵抗细胞模型并结合Western Blot、IHC、ICC和qRT-PCR实验方法对昔美酸沙美特罗降糖并改善胰岛素抵抗的作用机制进行初步的探究。
昔美酸沙美特罗的性状
作用机制
经过实验室前期的实验研究证明，昔美酸沙美特罗具有TZDs类作用，能降低Ⅱ型糖尿病SD大鼠的血糖，改善胰岛素抵抗，因此本课题对昔美酸沙美特罗降血糖改善胰岛素抵抗的作用机制进行了初步研究。通过对昔美酸沙美特罗进行与PPARγ受体结合的分子动力学模拟研究，确定了昔美酸沙美特罗能够与PPARγ很好的结合从而发挥其生理学效应，理论性地确定了昔美酸沙美特罗属于PPARγ的激动剂，并且能够很好与其受体相结合作用。Westernblot结果显示昔美酸沙美特罗能够上调磷酸化AMPKα1、磷酸化AKT2和磷酸化Ser112位的PPARγ蛋白的表达，同时上调ADIPOQ的蛋白表达，并且下调由CDK5介导的Ser273位的PPARγ磷酸化，大量文献表明高抑制PPARγSer273磷酸化的配体是最佳候选抗糖尿病药物，此结论与WeiliZheng等人的研究成果相符⁽³⁹⁾。在我们同时加入昔美酸沙美特罗和高选择性PPARγ抑制剂T0070907后，发现磷酸化的AMPKα1、AKT2和Ser112位的PPARγ磷酸化都没有上调，p-PPARγSer273的磷酸化抑制效果也消失，这足以说明昔美酸沙美特罗确实是作用于PPARγ（前期也是针对PPARγ受体虚拟筛选得到的昔美酸沙美特罗），并且通过PPARγ影响AMPKα1和AKT2，进而改善胰岛素抵抗。但ADIPOQ在加入T0070907后仍然表现为表达上调，说明昔美酸沙美特罗调节ADIPOQ并不依赖PPARγ的表达，因此昔美酸沙美特罗改善胰岛素抵抗可能是以AMPK/AKT通路为主，以ADIPOQ为辅。
免疫组化实验和免疫细胞组化实验发现，昔美酸沙美特罗同样能上调SD大鼠肝组织、胰腺组织的PPARγSer112、p-AKT2、AMPKα1及ADIPOQ的表达，并抑制p-PPARSer273。但最佳剂量组别并不一致，可能是因为SD大鼠的个体差异性，或者将样本量进一步扩大。qRT-PCR的结果也显示昔美酸沙美特罗上调了AMPKα1和ADIPOQ的mRNA的表达[1]。
参考文献
[1] 宰小丽. 794ap（昔美酸沙美特罗）改善胰岛素抵抗机制的初步研究[D]. 重庆理工大学, 2017.