VCAP人前列腺癌细胞的简介
VCAP人前列腺癌细胞系是一种从前列腺癌患者脊椎转移灶中建立的重要实验模型。VCAP细胞系于1997年建立,源自一名59岁白人男性前列腺癌患者的脊椎转移灶。该细胞系经过小鼠体内传代后建立体外培养,兼具雄激素敏感性和多种关键基因突变,已成为前列腺癌基础研究和转化医学研究中不可或缺的模型。前列腺癌是欧美国家男性最常见的恶性肿瘤之一,早期前列腺癌对雄激素剥夺治疗敏感,但多数患者最终会发展为去势抵抗性前列腺癌,这是导致患者死亡的主要原因。建立能够模拟疾病进展过程的体外细胞模型,对于揭示去势抵抗性前列腺癌的发生机制和开发新的治疗策略具有重要意义。
VCAP细胞来源
VCAP人前列腺癌细胞来源于前列腺癌患者的骨转移灶,细胞形态呈典型的上皮细胞样,在培养过程中以小细胞团块形式贴壁生长。VCAP细胞培养时常出现悬浮的细胞团块和碎片,这属于正常现象。
VCAP细胞的特征
雄激素受体高表达:VCAP人前列腺癌细胞表达高水平的野生型雄激素受体,其生长和基因表达高度依赖雄激素。这一特性使其成为研究雄激素受体信号通路及抗雄激素药物的理想模型。
TMPRSS2-ERG基因融合:约50%的前列腺癌患者携带TMPRSS2-ERG基因融合,而VCAP人前列腺癌细胞天然携带这一关键融合基因,使其成为研究ERG致癌机制的首选模型。
TP53功能获得性突变:VCAP人前列腺癌细胞携带TP53 p.R248W功能获得性突变,该突变不仅破坏了p53的抑癌功能,还赋予了促进肿瘤细胞侵袭、转移和进展的新能力。
染色体碎裂现象:全基因组测序分析显示,VCAP人前列腺癌细胞存在染色体碎裂,第5号染色体q臂发生复杂重排,并伴有PPP2R2A、USP10等多个基因的纯合缺失。
VCAP人前列腺癌细胞培养注意事项
生长速度:该细胞增殖缓慢,传代后约需48小时才能完全贴壁,从传代到达到50%融合度可能需要2周或更长时间。
消化方法:常规胰酶难以使其完全分散,必须使用Gibco TrypLE Express进行消化,否则细胞容易聚团生长。
培养基选择:标准培养使用DMEM(含1.5g/L NaHCO₃)或RPMI 1640,添加10%-20%胎牛血清。若使用高碳酸氢钠DMEM,需将CO₂浓度提高至7%-10%。
传代与换液:传代比例建议为1:2至1:4,每周换液2次。漂浮细胞可离心收集后重新加入培养瓶继续培养。
应用研究
CD326与雄激素受体表达调控研究
干涉前列腺癌细胞系 VCAP人前列腺癌细胞的 CD326的表达 ,观察其对雄激素受体(AR)、前列腺特异性抗原 (PSA)的表 达以及前列腺癌细胞表型的影响 ,明确 CD326与雄激素 抵抗性前 列腺癌 发生之间的相关性 。结论 :下调 VCAP人前列腺癌细胞 CD326水平可降低 AR的表达 ,使前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力降低[1]。证实CD326可通过调控雄激素受体表达促进去势抵抗性前列腺癌的恶性进展,为去势抵抗性前列腺癌的筛查与治疗提供了新的潜在靶点。
染料木黄酮抑制VCaP细胞增殖研究
用染料木黄酮(GDN)对去势抵抗性前列腺癌细胞 VCaP增殖影响。显示GEN能够抑制体外培养的去势抵抗性前列腺癌细胞 VCaP增殖,其作用机制可能与阻滞细胞周期并伴随相关周期蛋白表达的改变有关[2]。证实染料木黄酮能够通过诱导G2/M期阻滞、调控细胞周期相关蛋白表达,抑制去势抵抗性前列腺癌VCaP细胞的增殖。VCAP人前列腺癌细胞作为典型的去势抵抗性前列腺癌模型,为该天然产物的抗肿瘤活性评价提供了可靠的体外筛选平台。
参考文献
[1] 杨帆, 周幸春, 李晓晴, 等. 干扰CD326可抑制VCaP细胞雄激素受体表达并降低细胞的增殖、侵袭及迁移能力[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2015,31(10):1358-1362.
[2] 李飞, 朱彦锋, 陈静瑶, 等. 染料木黄酮对去势抵抗性前列腺癌VCaP细胞增殖的影响[J]. 中华男科学杂志, 2016, 22(12): 1065-1070.