白花丹(Plumbago zeylanica L.)又称猛老虎、一见消等，主要分布在我国广西、海南、云南等西南一带，是我国壮医、黎医、维医、傣医等民族医学常用药材。白花丹常用于治疗跌打损伤、风湿骨痛、肝脾肿大、白癜风、牛皮癣等，现代药理研究表明白花丹具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等生物活性，具有极大的药用和开发价值。白花丹所含化学成分主要有茶醌类、香豆素类、黄酮类、有机酸类、生物碱类等，其中，兰雪醌(又称白花丹醌)是白花丹的主要活性成分。
天然来源萘醌类化合物广泛分布于自然界中，具有多种生物活性，因其功能和临床应用的特性，该类化合物受到国内外学者的高度关注，而高效、稳定的制备方法能够为其进一步的研究和开发提供有力的支撑。兰雪醌是一种天然a-萘醌类小分子化合物，易溶于乙醇等有机溶剂。在以往的研究中，白花丹的常用提取方法有回流提取法、水蒸气蒸馏法、索氏回流提取法等，这些方法具有溶剂消耗大、操作烦琐、需要高温、提取时间长等特点，而长时间高温提取可能会促使兰雪醌降解。超声辅助提取是利用超声波空化作用加速原料中活性成分溶出的方法，具有有机溶剂消耗少，无需超高温，提取时间短，目标组分提取率高等优点，具有广阔的应用前景。
莫秋月等人以兰雪醌的得率为指标，通过单因素试验、响应面优化试验对白花丹的超声提取工艺进行探索优化，以期掌握白花丹的最佳提取工艺，实验证明，利用超声辅助提取方法提取白花丹中兰雪醌的工艺稳定可靠。
检测方法[1]
1、兰雪醌线性关系考察
精密称取兰雪醌对照品5mg于10mL棕色量瓶中，加入95%乙醇溶解并定容，即得兰雪醌对照品溶液。取兰雪醌对照品溶液0.04、0.08、0.12、0.16、0.2mL置于10mL棕色量瓶中，95%乙醇定容，于265nm波长处测定吸光度。以兰雪醌质量浓度(X)为横坐标，吸光度(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程:Y= 62X + 0.0138(R2=0.9990)，兰雪醌在2~10ug・mL-1内与吸光度线性关系良好。
2、供试品溶液制备
取干燥白花丹根500g放入高速粉碎机内进行粉碎，重复3次粉碎操作，过3号筛。粉末状样品避光放置阴凉通风干燥处，备用。精密称量白花丹干燥粉末1g置于50mL棕色具塞试管中，按照常规条件(超声时间40min、提取温度40℃、料液比1:30)进行提取，提取结束后3000r・min-1离心10min,取上清液。残渣以相同条件再提取1次，合并上清液即得白花丹根中兰雪醌提取液。准确吸取0.5mL提取液置于10mL棕色量瓶中，95%乙醇定容，得供试品溶液。
3、方法学考察
3.1精密度试验：按“1”项下方法制备兰雪醌对照品溶液3份，265nm处测试吸光度。结果平均吸光度为0.25，RSD=0.16%，表明本试验精密度良好。
3.2重复性试验：按“2”项下方法制备供试品溶液6份，265nm处测试吸光度。结果平均吸光度为0.37，RSD=0.79%，可知该方法重复性良好。
3.3稳定性试验：按“2”项下方法制备供试品溶液，于0、2、4、6、8、10、12h时测量265nm处的吸光度。结果平均吸光度为0.37, RSD=1.6%，说明供试品溶液在12h内比较稳定。
3.4加样回收试验：精密称取1g白花丹干燥药材粉末6份，加入适量对照品，按“2”项下方法制备供试品溶液，在265nm处测试吸光度，并计算回收率。结果平均回收率为110.52%，RSD=1.8%，表明本方法回收率良好。
4、白花丹中兰雪醌得率测定
按照“2”项下方法制备供试品溶液，测定吸光度，每个试验重复3次。相应试剂作为空白。按以下公式计算兰雪醌得率:
兰雪醌得率(%)=(C×V×D)/m×100%
式中:C为提取液浓度;V为提取液定容体积;D为稀释倍数;m为粉末质量。
参考文献
[1] 莫秋月,时晨,袁慧,等. 响应面法优化兰雪醌超声辅助提取工艺的研究[J]. 中南药学,2024,22(7):1762-1766. DOI:10.7539/j.issn.1672-2981.2024.07.013.