RAT EGF ELISA KIT的应用和简介

2026/5/22 8:01:25 作者:观微

RAT EGF ELISA KIT是一种用于体外定量检测大鼠样本中EGF含量的免疫学检测工具。EGF是一种由53个氨基酸组成的小分子多肽,属于表皮生长因子家族成员,含三个二硫键特征结构,在哺乳动物中具有高度保守性,成熟的人EGF与大鼠EGF约70%同源。EGF通过与表皮生长因子受体(EGFR)结合,参与细胞增殖、分化、迁移以及皮肤损伤修复等生理过程。

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应用实例

胃溃疡是一种常见的消化系统疾病,其发病机制涉及胃黏膜防御因子与攻击因子之间的失衡。表皮生长因子(EGF)作为重要的黏膜保护因子,能够促进胃上皮细胞增殖与迁移,加速溃疡面的修复愈合[1]。在实验研究中,准确量化大鼠EGF表达水平是评估药物疗效和探索作用机制的核心环节。

在探讨白及枳实汤对吲哚美辛诱导的大鼠急性胃溃疡保护作用的研究中,采用RAT EGF ELISA KIT检测各组大鼠血清EGF水平。研究将48只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(奥美拉唑)及白及枳实汤低、中、高剂量组。结果显示,与空白对照组相比,模型组大鼠EGF含量显著降低;而经白及枳实汤干预后,中、高剂量组大鼠EGF水平均显著回升[1]。这一结果表明,RAT EGF ELISA KIT能够有效捕捉药物干预前后EGF的动态变化,为证实白及枳实汤促进胃黏膜修复的作用提供了直接证据。

在探究针刺结合黄芪建中汤对胃溃疡大鼠EGF及胃黏膜功能影响的研究中,同样借助RAT EGF ELISA KIT完成了血清EGF的定量检测。该研究采用冰乙酸灌胃法建立GU大鼠模型,将大鼠分为对照组、模型组、黄芪建中汤组、针刺组及联合组。ELISA检测结果显示,模型组大鼠EGF水平较对照组显著降低;各治疗组EGF水平均有不同程度升高,其中联合组升高最为显著[2]。通过RAT EGF ELISA KIT获得的准确数据,有力支持了“针药协同增效”的科学假设。

核心优势

上述两项研究均选用了RAT EGF ELISA KIT进行EGF检测,其核心优势主要为以下几个方面。首先是高灵敏度与宽检测范围,市售RAT EGF ELISA KIT的检测范围通常为15.63–1000 pg/mL,灵敏度可达9.38 pg/mL甚至更低,能够满足大鼠生理及病理状态下EGF宽范围波动的检测需求。第二是样本兼容性强,该试剂盒适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等多种样本类型。第三,操作标准化,严格按照试剂盒说明书操作,可保证实验结果的批内和批间重复性,为多批次动物实验数据比较提供可靠性。

实验原理

RAT EGF ELISA KIT主要采用双抗体夹心法,先用纯化的大鼠EGF抗体预包被于96孔微孔板中。然后加入待测样品(或标准品),样品中的EGF与固相抗体结合。接下来依次加入生物素化检测抗体和HRP(辣根过氧化物酶)标记的亲和素,形成“抗体–抗原–检测抗体–酶标”复合物。再次加入TMB底物,在HRP催化下显色,颜色深浅与样品中EGF含量呈正相关。最后加入终止液(通常为硫酸溶液)停止反应,用酶标仪在450 nm波长处测定OD值,通过标准曲线计算样品中EGF浓度。

注意事项

血清样本需在4°C条件下1000×g离心15–20分钟,取上清立即检测或分装后于-80°C保存,避免反复冻融[1-2]。然后每次实验必须重新制备标准曲线,不得使用历史数据替代。使用RAT EGF ELISA KIT时需严格按照说明书要求的温度和时间进行孵育,通常为37°C。操作过程中,每步洗涤需彻底,以降低非特异性背景信号。

参考文献

[1] 陈祺, 孟丽媛, 卢雨菲, 等. 白及枳实汤对大鼠急性胃溃疡的作用及机制研究[J]. 湖北科技学院学报(医学版), 2025, 39(6): 471-475,493.

[2] 武九龙, 范钦梅. 针刺结合黄芪建中汤调节PI3K/AKT信号通路对胃溃疡大鼠表皮生长因子胃黏膜功能的影响[J]. 河北医学, 2025, 31(12): 1983-1989.

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