PoFAine Insulin,INS ELISA Kit简介
PoFAine Insulin,INS ELISA Kit 是一种用于定量检测猪胰岛素含量的试剂盒。PoFAine Insulin,INS ELISA Kit采用双抗体夹心酶联免疫法,微孔板预包被抗猪胰岛素特异性抗体,加入待测样本或标准品后,样本中的胰岛素与包被抗体结合,再与酶标检测抗体反应,通过显色后测定450 nm处吸光度值,从而定量计算胰岛素浓度。
在代谢性疾病研究中,小型猪因其与人类在生理、代谢特征上的高度相似性,已成为糖尿病、肥胖及代谢综合征的理想动物模型。准确测定小型猪血清胰岛素水平,对于评估胰岛β细胞功能、胰岛素敏感性及葡萄糖耐量状态至关重要。PoFAine Insulin,INS ELISA Kit正是为此需求而设计的高特异性、高灵敏度检测产品。
PoFAine Insulin,INS ELISA Kit特点
PoFAine Insulin,INS ELISA Kit有非常强的种属特性，专一识别猪胰岛素分子，与人胰岛素、C肽及胰岛素类似物无明显交叉反应。第二是灵敏度与精密度优异，同类猪Ins-ELISA试剂盒的检测范围为1.64–123 μIU/mL，批内变异系数（CV）仅3.8%，批间CV为2.6%[1]。其次，PoFaine Insulin,INS ELISA Kit同样具备卓越的批内/批间重复性，满足临床前研究的严格质控要求。另外PoFAine Insulin,INS ELISA Kit检测的是真胰岛素，而非免疫反应性胰岛素，PoFaine Insulin,INS ELISA Kit采用高特异性抗体，避免胰岛素原及其他中间代谢物的干扰，所测值反映的是具有生物活性的完整胰岛素含量[1]。
TEDINS ELISA Kit与RIA方法的对比
尽管目前啮齿类动物被广泛用于人类实验研究,但并不能为某些人类疾病提供准确的动物模型。小型猪是代谢领域极有价值的模型动物，其胰腺形态和胰岛素结构与人类极为相似。猪的皮肤结构也与人类相似，适用于人类皮肤慢性溃疡模型的建立和研究。在以小型猪为模型的代谢性疾病研究中，常涉及胰岛素含量的检测，常用的检测方法有放射免疫法(insulin radioimmunoassay,RIA)和酶联免疫法 (insulin enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)两种，国内外有学者采用人特异的胰岛素 RIA 试剂盒 (Ins-RIA血清胰岛素浓度，也有采用猪特异的胰岛素 ELISA 试剂盒(Ins-ELISA)检测猪血清胰岛素浓度。虽然猪Ins-ELISA 试剂盒种属特异性强，但费用高昂，约为人Ins-RIA 试剂盒的17倍,当进行大批量检测时，Ins-ELISA 检测法花费巨大。人Ins-RIA试剂盒除费用低廉外，还易于购买，因此，部分研究者更愿选择人Ins-RIA 试剂盒检测[1]。
研究中同时使用人胰岛素RIA试剂盒（Ins‑RIA）和猪特异性ELISA试剂盒（Ins‑ELISA）检测了219份巴马小型猪血清样本。结果发现测定值差异显著，PoFaine Insulin,INS ELISA Kit类方法测得的胰岛素浓度均值显著低于人Ins‑RIA法[1]。这主要是因为RIA无法区分胰岛素原及其类似物，交叉反应率高达30%–100%，导致测定值“虚假”偏高；而PoFaine Insulin,INS ELISA Kit能捕获完整胰岛素，结果更真实可靠。
虽然猪特异性ELISA试剂盒的费用远高于人RIA试剂盒，但PoFaine Insulin,INS ELISA Kit仍应是开展小型猪胰岛素检测的优先选择，首先是数据国际可比性，使用种属正确的PoFaine Insulin,INS ELISA Kit所获得的结果，能被国际同行直接认可，避免因方法学错误导致稿件被拒或质疑。然后能避免胰岛素原干扰，在糖尿病模型或胰岛功能受损状态下，血清中胰岛素原比例升高，RIA法会严重高估胰岛素水平，而PoFaine Insulin,INS ELISA Kit可精准反映真正的胰岛素分泌能力。最后是试剂盒和标准品匹配，PoFaine Insulin,INS ELISA Kit采用猪胰岛素标准品，校准曲线与样本基质一致，定量更准确。
综上所述，PoFaine Insulin,INS ELISA Kit是测定小型猪血清胰岛素浓度的金标准方法之一。虽然单次检测成本高于人RIA试剂盒，但其数据准确性、特异性和国际认可度均显著占优。若因经费限制需使用人RIA试剂盒，则必须通过本研究提供的回归方程进行校正[1]。对于追求科学严谨性的研究人员，直接采用PoFaine Insulin,INS ELISA Kit是保障实验质量的最佳选择。
参考文献
[1] 杨梦宇, 高芸艺, 李艳, 等. 人胰岛素放射免疫分析试剂盒测定小型猪胰岛素的可行性研究[J]. 四川大学学报（医学版）, 2017, 48(3): 418-421.