HT22细胞(小鼠海马神经元细胞) (STR鉴定正确)的培养方法

2026/5/30 8:00:48 作者:火华

简介

HT22细胞(小鼠海马神经元细胞) (STR鉴定正确)(HT22细胞)是小鼠海马神经元细胞系,其生长形态、生理特性、激活方式等与原代海马神经元细胞有相似性,常用于神经退行性疾病的研究。海马体作为大脑中负责学习与记忆的核心区域,其神经元损伤是糖尿病脑病的重要病理基础。研究表明,高糖或晚期糖基化终末产物(AGEs)可诱导HT22细胞氧化应激、炎症反应及凋亡,模拟糖尿病脑病中海马神经元退行性变的病理过程。因此研究人员通过高糖刺激HT22细胞建立高糖损伤的DE模型[1]。

 HT22细胞(小鼠海马神经元细胞) (STR鉴定正确)的性状

HT22细胞(小鼠海马神经元细胞) (STR鉴定正确)的性状

培养方法

(1)HT22完全培养基配制方案:基础培养基选用高糖DMEM占比89%,补充10%胎牛血清FBS及1%青霉素-链霉素双抗溶液。(2)HT22细胞复苏流程:快速解冻,将液氮保存的细胞冻存管迅速转移至37℃恒温水浴装置,持续轻柔振荡直至冰块融化,时长大约1min-2min;离心纯化,将解冻细胞悬液转移至含10%FBS的DMEM培养基中,以1000rpm处理5分钟,弃除上清;重悬接种,加入新鲜完全培养基轻柔重悬细胞沉淀,均匀接种于T25培养瓶或6cm培养皿,置于37℃、5% CO2培养箱中培养。(3)HT22细胞传代:当细胞融合率达到80%-90%时,按以下步骤执行传代:清除原培养液,用磷酸盐缓冲PBS洗涤2次,加入0.25%胰蛋白酶溶液酶解消化1-2min,立即加入2-3倍含FBS的完全培养基终止胰酶消化。室温下1000rpm/min处理5min,弃除上清后加入5mL新鲜完培轻柔吹打分散,将细胞悬液以1:3的比例分配至新培养容器,继续标准条件培养。(4)HT22细胞冻存:HT22细胞冻存液的配置比例为:10%DMSO+10%胎牛血清+80%完培。重复上述消化步骤,取对数生长期的HT22细胞,消化后离心收集细胞,用含10%DMSO的冻存液重悬细胞,分装至冻存管中,置于程序降温盒中,-80℃过夜后(24h内)转移至液氮罐中长期保存[1]。

参考文献

[1] 曾川汇. 桑叶DNJ提取物对高糖诱导HT22细胞损伤保护的机制研究[D]. 成都医学院, 2025. DOI:10.27843/d.cnki.gcdyy.2025.000261.

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