简介
GBC-SD是一种常用的人胆囊癌细胞系，可用于胆囊癌的体外生物学行为研究。该细胞可在含胎牛血清的完全培养基中常规复苏、贴壁培养，通过siRNA转染、细胞划痕及Transwell等实验，可用于探究SOCS3等关键基因对肿瘤细胞迁移、侵袭能力的调控作用，是研究胆囊癌发生发展机制及潜在干预靶点的重要体外模型。
GBC-SD（人胆囊癌细胞）的性状
培养方法
(1)GBC-SD（人胆囊癌细胞）培养实验室、洁净工作台、微量移液器、无菌巴氏吸管、培养瓶、15mL无菌离心管等试验常规用物紫外灯照射1小时。(2)在37℃水浴中预热含有10%胎牛血清的完全培养基5-10分钟。用75%酒精消毒细胞培养瓶，培养基瓶和其他材料，并将其放入无菌操作站备用。(3)从液氮中取出GBC-SD（人胆囊癌细胞）冷冻管，然后快速放入37℃水浴中。继续快速摇动冷冻管以促进冷冻保存溶液在1分钟内快速融化。(4)用75%酒精消毒冷冻管，并将其放入洁净工作台。打开冷冻管，用无菌巴斯德吸管快速均匀地吸取细胞悬液，转移到15mL无菌离心管中，立即加入10mL新鲜的37℃预热的完全培养基。拧紧管盖用封口膜加固。(5)室温下900转每分钟离心3min后，倒去全部培养基后加入5mL新鲜培养基，将细胞悬液吹打混匀后转入25cm²培养瓶中，瓶口过酒精灯火焰3-5秒，再次消毒瓶身后置于37.0℃，含5%CO₂培养箱中持续培养，再次消毒、整理实验用物。(6)24小时后，观察GBC-SD（人胆囊癌细胞）贴壁及成活情况，及时更换新培养基[1]。
GBC-SD（人胆囊癌细胞）的迁移、侵袭能力
研究人员通过细胞划痕实验发现，用有效的siRNA片段干扰调控GBC-SD（人胆囊癌细胞）的SOCS3的表达后，实验干扰调控组细胞的迁移能力较对照组明显下降，重复实验结果一致。进一步在细胞siRNA转染48小时后进行Transwell实验，分别进行细胞计数后以每个小室种植20000个细胞，24小时后进行染色、拍照，结果发现有效干扰调控人胆囊癌细胞中SOCS3的表达水平后胆囊细胞的侵袭能力下降。这说明在GBC-SD（人胆囊癌细胞）中SOCS3水平的改变可以影响肿瘤细胞的迁移和侵袭能力，且有可能在胆囊癌细胞中起到促进肿瘤的作用，这与目前大多数的研究发现不一致。目前研究发现认为SOCS3蛋白是JAK/STAT3通路重要的负调控抑制剂，在肝癌、胃癌、结肠癌等多种肿瘤中呈低表达状态，在这些肿瘤的发展中发现了这种负调节机制的作用[1]。
参考文献
[1] 杨松林. SOCS3对人胆囊癌细胞GBC-SD侵袭、迁移影响及机制研究[D]. 昆明医科大学, 2019. DOI:10.27202/d.cnki.gkmyc.2019.000388.