简介
MDA-MB-231是一种经典的人三阴性乳腺癌细胞系，广泛用于乳腺癌体外生物学行为与抗肿瘤药物筛选研究。该细胞可在含15%胎牛血清的DMEM高糖培养基中于37℃、5%CO₂条件下贴壁培养，经药物（如TO901317）处理后，可通过Hoechst染色观察到细胞核固缩、碎裂等典型凋亡特征，是探究乳腺癌细胞凋亡机制及药物干预效果的重要体外模型。
MDA-MB-231（人乳腺癌细胞）的性状
培养方法
（1）细胞株培养条件
采用15%胎牛血清的DMEM高糖的培养基培养细胞株MDA-MB-231、MCF-7，培养箱为37℃，5%CO₂。
（2）复苏细胞
预热恒温水浴槽，温度设置为37℃。取15mL离心管1个，加入2mL培养液，置于工作台试管支架上。从液氮容器中取出细胞冻存管，直接浸入水浴槽中，并不时轻轻晃动使其尽快融化。擦干冻存管表面的水后喷酒精，放入超净台中。使用移液器吸取已融化的细胞冻存液并将其缓慢注入离心管的培养液中，轻轻将细胞液吹打混匀。将离心管放入离心机中配平，1000rpm，20℃，离心5min。此时在空培养瓶中加入2ml培养液备用。细胞液离心结束后弃上清，向离心管中加入1mL培养液，用移液器轻轻吹打，使其悬浮并混匀，再将细胞液吸入培养瓶中，将培养瓶前后左右相同力度轻轻摇晃10次。在培养瓶左上角上写细胞系名称，右上角实验人姓名，右下角复苏日期，放置于5%CO₂，37℃培养箱中传代培养[1]。
TO901317促进MDA-MB-231细胞凋亡
当细胞处于凋亡状态时，细胞核中的DNA会出现缩小凝集的现象。使用Hoechst33258染色后，染料将穿过细胞膜，与DNA结合，此时用倒置荧光显微镜观察染色细胞，会发现未发生凋亡的细胞，细胞核为淡蓝色规则样圆形，处于凋亡状态的细胞，细胞核会出现呈固缩或是碎块状不规则形，且颜色变深变亮的现象。使用Hoechst33342染色观察不同浓度TO901317分别处理MCF-7和MDA-MB-231细胞24h后细胞核的变化：Control组核形态正常规则，呈圆或者是椭圆且荧光均匀，药物处理后，随着浓度的增加，细胞核发生固缩，核膜溶解，细胞核明显缩小甚至碎裂，形态呈不规则状，荧光不均且强度变大，部分细胞可以观察到凋亡小体的发生。TO901317处理浓度越高，现象越明显，说明凋亡增多[1]。
参考文献
[1] 丁维珂. TO901317促进MCF-7与MDA-MB-231人乳腺癌细胞凋亡的研究[D]. 南华大学, 2015.