研究背景
食管癌是发生于食管上皮组织的肿瘤，是世界第九大肿瘤，全球每年约有30万人死于食管癌。食管癌主要有两种亚型：鳞癌和腺癌。腺癌多位于远端食管,而鳞癌则可贯穿整个食管。在我们国家的食管癌发病中90%以上的组织学类型都是鳞状细胞癌，少数则为起源于食管腺体或异位胃粘膜的腺癌。人食管鳞癌细胞是食管鳞癌种的病变细胞，将抑癌基因直接结合到DVL2和FZD1基因的启动子区抑制Wnt/β-catenin信号通路活性可以在人食管鳞癌细胞中发挥抑癌功能[1]。
体外培养及生物学性状
实验研究人食管鳞癌细胞的体外培养及生物学性状：自原发食管鳞癌组织中获取标本，应用消化培养法培养出可连续传代的肿瘤细胞，对培养的细胞进行形态学观察，免疫组织化学鉴定；MTT法测定细胞数，绘制生长曲线和计算细胞倍增时间，平板克隆实验以测定平板克隆形成率，流式细胞仪测定细胞周期分布。结果发现，30例患者的肿瘤组织有6例成功体外培养出肿瘤细胞，培养出的细胞符合鳞癌特性；细胞生长具有平台期，细胞倍增时间(33.12±6.10)h，平板克隆形成率(15.73±4.46)%；(77.57±6.57)%细胞处于细胞增殖的G0，G1期，少数细胞处于活跃的增殖期。故可得出结论，人食管鳞癌细胞成功获得了体外培养，肿瘤细胞的增殖能力不同，只有少数细胞增殖活跃[2]。
有关研究
为了探讨小檗碱(berberine，Ber)对人食管鳞癌细胞株EC9706的生长抑制作用及其作用机制。研究人员用Ber作用E9706细胞后，采用光学显微镜观察细胞形态学变化，用MTT法检测不同浓度Ber在不同时间对EC9706细胞增殖的影响；采用TUNEL法和流式细胞仪Annexin-V Alexa 488/PI法检测Ber对EC9706细胞凋亡的影响；PI染色法检测经Ber作用后EC9706细胞周期分布的改变；用Western blotting检测Ber对EC9706细胞p53，c-myc，cyclin D1蛋白表达的影响；用免疫荧光方法检测由DNA双链断裂引起的H2AX磷酸化。
结果，Ber体外能显著抑制人食管鳞癌细胞株EC9706的生长增殖，其抑制作用与药物浓度及作用时间呈正相关关系，作用48h EC9706细胞IC_(50)值约为50μM；Ber作用后DNA双链断裂明显升高，G2/M期细胞比例显著上调，但凋亡现象不明显；同时实验还发现Ber可以明显上调p53的表达并抑制c-myc和cyclin D1蛋白表达。也就是说，Ber可诱发DNA损伤，并可通过细胞G2/M期阻滞而明显抑制EC9706细胞的增殖，上调野生型p53蛋白表达以及下调原癌基因c-myc和cyclin D1蛋白表达可能是Ber抑制EC9706细胞增殖的机制[3]。
参考文献
[1]张翀.ZNF382抑制人食管鳞癌细胞生长与转移的功能与机制研究[D].重庆医科大学,2018.
[2]徐驯宇,孙志刚,黄盛东,等.人食管鳞癌细胞的体外培养及生物学性状[J].福建医科大学学报, 2009, 43(1):4.DOI:10.3969/j.issn.1672-4194.2009.01.003.
[3]刘巧,刘招舰,姜海燕,等.小檗碱对人食管鳞癌细胞的遗传毒性及生长抑制作用[C]//全国医学遗传学学术会议.2009.DOI:ConferenceArticle/5aa03dafc095d722206b67db.