介绍
远志皂甙B是远志其中有效成分之一，具有促进智力、减少心肌损伤、镇咳和祛痰的作用，在远志中的含量为1 .62％～2 .26％。有研究表明，在PC‑12细胞中，远志皂甙B能促进自噬，加速突变α‑突触核蛋白和亨廷顿蛋白的降解，可用于帕金森病和亨廷顿病的研究。远志皂甙B可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂，不溶于石油醚和乙酸乙酯；其英文名为Sinegin3，Onjisaponin B；分子式为C75H112O35。
图一 远志皂甙B
制备
目前，远志皂甙B主要通过常规方法分离得到，一般是先醇提取，再通过石油醚、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取，再采用乙酸乙酯层或正丁醇层进行硅胶柱层析，得到远志皂甙B。常规方法使用硅胶柱层析，分离时间长、收率低、成本高，不利于工业化生产。
1)脱脂：将远志原料粉碎，采用远志原料质量10‑15倍量的第一有机溶剂对远志原料进行回流提取多次，回流提取的温度为50℃‑60℃，每次回流提取时间为2h，第一有机溶剂为石油醚或乙酸乙酯；过滤收集滤液，将滤液浓缩得到提取渣，回收第一有机溶剂。取远志原料10kg(远志皂甙B含量1 .82％)粉碎至60目，用远志原料质量10倍量的石油醚在60℃下回流提取3次，每次2h，过滤收集滤液，将滤液浓缩得到提取渣， 并回收石油醚。
2)醇提取：采用浓度为85％‑95％的乙醇，乙醇的用量为远志原料质量的10‑15倍， 在60℃‑70℃下对提取渣进行多次提取，每次提取时间为2h；过滤收集滤液，将滤液浓缩至乙醇浓度为30％‑50％，得到第一浓缩液。将提取渣采用远志原料量15倍量、浓度为85％的乙醇，在65℃下提取 3次，每次2h，过滤收集滤液，将滤液浓缩至乙醇浓度为30％，得到第一浓缩液。
3)吸附：采用大孔树脂对第一浓缩液进行吸附，收集吸附流出液；其中，大孔树脂的类型为AB‑8、D101、D201、D301、DM130和SP825中的任一种；本实施例中采用的是DM130大孔树脂吸附。
4)浓缩沉降：将吸附流出液进行浓缩，加入絮凝剂，絮凝剂为壳聚糖，加入壳聚糖的体积是吸附流出液浓缩后得到的液体体积的6％‑15％；依次进行搅拌、静置、离心、过滤， 其中，搅拌的温度为60 ℃ ‑65 ℃ ，搅拌时间为30min；静置为在1 5 ℃ ‑25 ℃条件下静置24h‑ 48h，收集沉淀并干燥。将吸附流出液浓缩至少量，加入吸附流出液浓缩后得到的液体体积 10％的壳聚糖，在60℃下进行搅拌30min，20℃下放置48h，离心，过滤，收集沉淀，将沉淀干燥。
5)分离纯化：采用沉淀质量5‑10倍量的有机混合溶剂对沉淀进行搅拌提取，有机混合溶剂为二氯甲烷‑甲醇混合溶剂或三氯甲烷‑甲醇混合溶剂，其中，二氯甲烷与甲醇的体积比值和三氯甲烷与甲醇的体积比值均为9:1；提取液浓缩至无溶剂，再加入浓度为95％ 的乙醇搅拌溶解，浓缩得到第二浓缩液；再加入第二浓缩液质量1‑2倍量的第二有机溶剂， 第二有机溶剂为丙酮或乙醚，且丙酮的体积浓度为80％‑90％，乙醚为纯品；搅拌至结晶析出，静置8h‑12h，过滤，得到远志皂甙B粗品。沉淀采用沉淀质量10倍量的三氯甲烷‑甲醇混合溶剂进行搅拌提取， 其中三氯甲烷‑甲醇比例为9:1，搅拌提取2次，每次1 .5h，提取液浓缩至无溶剂，加入浓度为95％的乙醇搅拌溶解，浓缩至少量，再加入浓缩液质量1 .5倍量、体积浓度为85％的丙酮，搅拌至结晶析出，静置12h，过滤，得到远志皂甙B粗品。
6)在远志皂甙B粗品中加入远志皂甙B粗品质量15‑30倍量、浓度为60％‑80％的乙醇，在60℃‑70℃进行溶解，加入远志皂甙B粗品质量的8％‑15％的活性炭进行脱色，过滤收集滤液，将滤液浓缩至质量为远志皂甙B粗品质量的1‑3倍量，4 ℃ ‑8 ℃放置24h‑36h析出晶体，过滤得到结晶，用乙醇漂洗结晶，干燥后得到精制的远志皂甙B。远志皂甙B粗品采用远志皂甙B粗品质量15倍量、浓度为80％的乙醇， 在65℃下溶解后，加入远志皂甙B粗品质量8％的活性炭，在65℃下进行脱色1h，过滤，滤液浓缩至粗品量的1 .5倍量，然后在4℃下放置24h，过滤得到结晶，用少量乙醇漂洗结晶，干燥，共得到0.154kg产品，远志皂甙B含量为98 .61％，提取率1 .54％，有效成分回收率为 83 .44％，HPLC图谱如图二所示[1]。
图二 HPLC图谱
参考文献
[1]陕西嘉禾生物科技股份有限公司.一种从远志中制备远志皂甙B的方法:202310277699.5[P].2024-11-29.