背景技术
酰基谷氨酸钠是一类多功能的表面活性剂，具有良好的乳化、稳定和保湿性能。它们广泛应用于食品、化妆品和个人护理产品中，用于提高产品的稳定性和性能。通过合理选择和使用酰基谷氨酸钠，可以进一步优化产品的性能，满足不同应用的需求。常见的酰基谷氨酸钠包括硬脂酰基谷氨酸钠、月桂酰基谷氨酸钠、肉豆蔻酰基谷氨酸钠、棕榈酰基谷氨酸钠、油酰基谷氨酸钠、亚油酰基谷氨酸钠和α‑亚麻酰基谷氨酸钠等。
相比于其他酰基谷氨酸钠，硬脂酰基谷氨酸钠被广泛使用，具有良好的安全性，因此被美国食品药品监督管理局(FDA)认定为“公认为安全”(GRAS)的食品添加剂，适用于食品工业。随着硬脂酰基谷氨酸钠作为日化原料的用途越来越广，其市场需求日益增大，因此会出现使用部分其他酰基谷氨酸钠替代硬脂酰基谷氨酸钠的情况，但是常规的液相色谱法得到的色谱峰并不容易分辨出其他酰基谷氨酸钠和硬脂酰基谷氨酸钠的特征峰。
在常规的液相色谱法的灵敏度不能满足对硬脂酰基谷氨酸钠的检测需求的前提下，亟需一种使用多维液相色谱检测包含硬脂酰基谷氨酸钠和至少一种其他酰基谷氨酸钠的混合物中硬脂酰基谷氨酸钠的方法。
分析方法
制备第一维流动相和第二维流动相：第一维流动相由包含三氟乙酸铵的第一混合有机溶液和磷酸二氢钾水溶液组成；第一混合有机溶液包含异丙醇和乙腈，异丙醇和乙腈的体积比选自1:5.5；基于第一维流动相的总体积，磷酸二氢钾水溶液的体积为25％；磷酸二氢钾水溶液中磷酸二氢钾的浓度选自20mmol/L。
第二维流动相为包含四氟丁二酸的第二混合有机溶液；第二混合有机溶液包含正己烷和丙酮，正己烷和丙酮的体积比选自1:16；基于第二混合有机溶液的总质量，四氟丁二酸的质量百分含量选自8.5％。
精确称取10mg的月桂酰基谷氨酸钠转移至10mL的容量瓶内，加入乙腈，至月桂酰基谷氨酸钠完全溶解后，再加乙腈定容至10mL，得1.0mg/mL的月桂酰基谷氨酸钠储备液，将其在室温下保存。精确称取10mg的硬脂酰基谷氨酸钠转移至10mL的容量瓶内，加入乙腈，至硬脂酰基谷氨酸钠完全溶解后，加乙腈定容至10mL，得1.0mg/mL的硬脂酰基谷氨酸钠储备液，将其在室温下保存。
取上述20μL的1.0mg/mL的硬脂酰基谷氨酸钠储备液，20μL的1.0mg/mL的月桂酰基谷氨酸钠储备液，再加入960μL样品，制得混合工作液1。取100μL混合工作液1，加入900μL样品，制得混合工作液2。取160μL混合工作液2，加入840μL样品，制得校准品6号点。取500μL校准品6号点，加入500μL样品，制得校准品5号点。取500μL校准品5号点，加入500μL样品，制得校准品4号点。取500μL校准品4号点，加入500μL样品，制得校准品3号点。取500μL校准品3号点，加入500μL样品，制得校准品2号点。取500μL校准品2号点，加入500μL样品，制得校准品1号点。对以上校准品1号点至校准品6号点，采用二维柱切换HPLC分析方法进行分析：制备得到的混合样品液经过所述自动进样器从而进入所述二维HPLC系统，切换所述六通阀，得到月桂酰基谷氨酸钠的色谱峰，然后再次切换六通阀，得到硬脂酰基谷氨酸钠的色谱峰，构建浓度和峰面积的关系，并通过测试数据得到校准曲线；其中，硬脂酰基谷氨酸钠、月桂酰基谷氨酸钠完全分离，不存在干扰，峰型对称[1]。
参考文献
[1] 浙江国盛源实业有限公司. 一种适用于硬脂酰基谷氨酸钠的HPLC分析方法:CN202510556139.2[P]. 2025-08-12.