人气管上皮细胞

无血清冻存液。人气管上皮细胞分离自气管组织。气管是呼吸系统的重要组成部分，它连接着喉部和肺部，是空气进入肺部的主要通道。气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线，它不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。人气管上皮细胞在气管内壁上形成一层连续的细胞层，按照从近端到远端呼吸道分布，包括纤毛细胞、无纤毛细胞和能分泌黏液的细胞等，它们共同构成了一个复杂的细胞网络。这些细胞紧密排列，形成了一道屏障，防止有害物质进入肺部，同时也参与调节气道的通畅性和湿润度。人气管上皮细胞具有多种功能。它们能够分泌黏液，黏附并清除吸入的异物和微生物，保持气道的清洁和通畅。同时，它们还能合成和释放多种生物活性物质，如细胞因子、生长因子和趋化因子等，参与调节气道的免疫反应和修复过程。此外，人气管上皮细胞还参与气道的神经调节和气体交换等生理过程。

人气管成纤维细胞是由胚胎中胚层的间充质细胞分化而来，形态多为纺锤形或星形扁平状，细胞核呈椭圆形，核仁明显，具有合成细胞外基质和修复组织损伤的功能。在体外培养中，刚分离的成纤维细胞呈圆形，悬浮于培养液中，30分钟后部分贴壁，6小时内完成贴壁并伸展成梭形，5-7天后细胞融合，排列紧密，表现出强大的增殖能力。

上皮细胞样仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的。获取的气管组织需保存于低温PBS溶液中，消化分离前使用无菌PBS冲洗，去除多余的连接组织和淋巴结等，尽量只留气管内部表面组织。用手术刀将组织切成1cm×2cm的碎片，置于PBS（含1mg／ml蛋白酶XⅣ）中，4℃消化12～24h，10％FBS终止消化后，振摇分离上皮细胞，600×g离心5min。加入配制好的BEGM（含100IU／ml青霉素，100IU／ml链霉素）培养液重悬细胞，转移入培养皿中，37℃孵育1h。采用差速贴壁法除去先贴壁的成纤维细胞后，再收集上皮细胞，调整密度后接种于Ⅰ／Ⅲ胶原包被的培养皿中，于37℃，5%CO2条件下培养。细胞贴壁后，每隔1d更换1次培养基，同时观察记录细胞的生长状态。气管人气管上皮细胞采用链霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。贴壁