MTS试剂

MTS试剂是一种在MTT基础上的改良试剂，含有一个新型的四唑化合物和一种电子偶联剂（ｐｈｅｎａｚｉｎｅ　ｅｔｈｏｓｕｌｆａｔｅ，PES），PES具有增强的化学稳定性，这使它可与MTS混合形成稳定的溶液。MTS被细胞生物还原成为一种有色的甲臜产物，可直接溶解于培养基中。这种转化是在代谢活跃的细胞中的脱氢酶产生的NADPH或NADH的作用下完成的。在490nm处检测到的甲臜产物的量与培养中的活细胞数成正比。 ​MTS细胞分析方法是一种间接的细胞代谢活性测定方法。其原理基于MTS试剂的化学反应。MTS试剂可以通过细胞色素P450酶系统被细胞内的NAD(P)H还原为水溶性的甲臜溶液 (formazan)。这个还原过程通常与细胞的代谢活性相关，因此MTS还原产物的生成量可以作为细胞的代谢活性指标。

MTS检测原理图
MTS试剂中的甲臜溶液是无色的，但在一定条件下，甲臜溶液会进一步与MTS试剂中的二甲基亚砜（DMSO）反应，生成有色的产物。这个有色产物可以通过吸光度测量，以间接评估细胞的代谢活性。MTS细胞分析方法具有以下优点：
高灵敏度：MTS细胞分析方法对细胞代谢活性的变化具有很高的灵敏度，可以检测到细微的变化。甲臜溶液的还原反应和与DMSO的反应是催化反应，使产物生成速度加快，增强了灵敏度。
相对快速：MTS细胞分析方法通常只需要几小时就可以完成，相比于其他细胞分析方法，省去了长时间培养的步骤。
易于操作：MTS试剂本身是水溶性的，可以直接添加到细胞培养物中，无需进行额外的处理步骤。
适用于活细胞：MTS试剂可以与活细胞中的NAD(P)H反应，因此可以测量细胞的代谢活性和细胞存活状态，对于活细胞具有较好的适应性。
适用范围广：MTS细胞分析方法可以适用于各种类型的细胞，包括悬浮细胞和贴壁细胞，以及不同来源的细胞，如哺乳动物细胞、微生物细胞等。

MTS细胞分析方法同时存在一些不足：
不适用于长期培养：MTS细胞分析方法的优点之一是快速，但对于长期培养的细胞来说可能不太适用。由于MTS试剂需要一定的孵育时间被还原，长时间的培养可能会导致结果的偏差。
细胞毒性：MTS试剂中含有一定浓度的二甲基亚砜（DMSO），在浓度较高或长时间作用下可能对细胞产生一定的毒性。在实验设计中需要考虑到这点。
不适用于细胞内作用机制研究：MTS细胞分析方法只能提供细胞的整体代谢活性信息，无法对细胞内的具体作用机制进行深入研究。对于需要了解细胞内分子机制的研究，需要结合其他分析方法进行进一步探究。