WB-F344 大鼠肝上皮样干细胞
WB-F344 大鼠肝上皮样干细胞 性质
贴壁;上皮细胞样WB-F344细胞是成年Fischer 344大鼠正常肝上皮细胞系,呈单层生长,种群倍增在开始时为20-23小时,但在12.5小时后增加。WB-F344细胞没有积累细胞质糖原,葡萄糖-6-磷酸酶阴性。WB-F344细胞表达肝祖细胞标志物(包括EpCAM、Thy1和Afp),用于研究肝细胞更新、分化和肝癌起源的成熟和多功能模型。上皮细胞样(多角形或卵圆形,呈铺路石状排列)1.尽量吸干净T25瓶原培养基;2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;4.将培养瓶放入37度培养箱消化;5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)肝;自发永生;Fischer 344;成年贴壁细胞B-F344(大鼠肝上皮样干细胞)“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%。接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力zui好时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。