NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞
| 中文名称 | NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞 |
|---|---|
| 中文同义词 | NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞 |
| 英文名称 | NIH3T3 mouse embryonic fibroblast |
| 英文同义词 | Mouse Embryonic CellsNIH-3T3,nih3t3;NIH/3T3 Mouse Embryonic Fibroblasts |
| CAS号 | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS号 | |
| 相关类别 | 细胞-细胞系 |
| Mol文件 | Mol File |
| 结构式 |
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞 性质
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞是1962年Todaro G和Green H从分离的瑞士小鼠胚胎中建立的；该细胞的生长受接触性抑制，汇合状态的单层细胞密度为40000个细胞/平方厘米；检测结果显示该细胞鼠痘病毒阴性；在塑料瓶中生长较好，在某些玻璃表面上可能状态不佳；细胞生长饱和时其密度可以达到约50000 cells/cm2。
NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞
NIH/3T3细胞是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触性抑制的连续传代成纤维细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株，建立的NIH/3T3细胞株又进行了5轮以上亚克隆。NIH/3T3细胞对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，对DNA转化及转染研究十分有用。经测试，NIH/3T3细胞鼠痘病毒呈阴性。1） 来源：小鼠胚胎2） 形态：成纤维细胞，贴壁生长1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
成纤维细胞样(梭形或多角形有触角)1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）胚胎；成纤维；自发永生；雄性；NIH Swiss贴壁细胞