NCI-H446 [H446]人小细胞肺癌细胞

NCI-H446细胞于1982年由D.Carney、A.F.Gazdar及其同事从一名61岁白人男性小细胞肺癌患者的胸腔液中分离出来，原始肿瘤的形态不是SCLC的特征。NCI-H446细胞是SCLC的生化和形态学变体，表达神经元特异性烯醇化酶和肌酸激酶的脑同工酶。NCI-H446细胞检测到L-DOPA脱羧酶、蛙皮素、加压素、催产素或胃泌素释放肽的水平。与正常细胞相比，NCI-H446细胞C-myc DNA序列扩增约20倍，C-myc RNA增加15倍。NCI-H446细胞最初在补充有10nM氢化可的松、0.005mg/mL胰岛素、0.01mg/mL转铁蛋白、10nM 17-β-雌二醇和30nM亚硒酸钠的无血清RPMI 1640培养基中繁殖。NCI-H446细胞在裸鼠中形成具有非典型SCLC组织学的可移植肿瘤。上皮细胞样(多角形或梭形)1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）小细胞肺癌；胸腔积液转移；男性；61岁贴壁细胞