PVDF膜

PVDF膜，又称为聚偏二氟乙烯膜，是一种在蛋白免疫印迹实验中常用的生物耗材。它把凝胶上分离开的蛋白质转移到自己身上，之后用特异性抗体来检测，进而确定目标蛋白的表达水平和分子量等关键信息。PVDF膜结合量是100-200μg/cm2，且PVDF的结合强度比NC膜强6倍。同时PVDF膜具有更好的机械强度和化学耐受性使其可以承受高强度的清洗，与尼龙或者NC膜相比更耐用。但PVDF膜不适合荧光显色，因为会有很高的背景。

PVDF膜根据孔径大小可分为0.45μm和0.2μm的，后者孔径小，对小分子蛋白有较好的拦截吸附，但背景可能会比前者稍高，一般大于20kD的蛋白就可以选择0.45μm的膜，小于20kD的蛋白建议选择0.2μm的膜。PVDF膜需要注意的是使用前需使用醇激活15~30秒。PVDF本身是一种疏水性的聚合物，在水溶液中不易充分湿润，因此醇处理还能帮助膜更好地在水性缓冲液中展开和浸湿。提高其亲水性，增加对水性溶液的透过性。醇溶液的选择以甲醇最常用，以外乙醇、异丙醇等醇溶液也都是可以的。无论使用哪种溶剂，重要的是确保PVDF膜在使用前进行适当的预处理，以优化蛋白质转印的效果。使用过程注意不要使膜干燥。